미생물화학실험 레포트

목차

1. 실험목표
2. 실험이론
3. Standard curve를 그리고, 직선의 방정식을 구해보자.
4. 측정한 sample의 농도는 얼마인가? (단위: ug/ml)
5. Reference

본문내용

빛이 물질에 닿으면 크게 4가지의 경우로 나누어진다.
①물질의 표면 반사 ② 물질의 표면에 들어간 후 반사 ③물질에 흡수 ④물질을 통과 / 이처럼 물체가 흡수할 수 있는 빛은 물질이 빛을 받아들이는 그 특성과 농도에 따라 차이를 보이게 된다. 이런 빛의 특성 중 물질에 닿아 통과하는 경우를 적용하여 용액 내에 물질의 농도를 정량하는 것이다. 이번 실험에서는 Bradford Assay 기법을 사용하여 발색시약 Coomassie Blue을 통해 샘플시약의 농도를 측정하는 흡광도법을 사용한다. 보통 UV 180~320nm, 가시광선 320~800nm의 빛을 주로 사용하지만 Coomassie-단백질 복합체는 595nm 파장을 가장 잘 흡수하기 때문에 이를 이용한다. 시료와 Coomassie의 발색반응을 확인 후, 분광광도계를 사용하여 빛의 양을 측정하고 표준곡선(X축-농도, Y축-흡광도)으로 표현하여 농도에 따른 흡광도를 비교한다.

참고자료

· The Spectrophotometer: A domo and practice experiment, BioNetwork, YouTube
· How to create a linear standard curve in exel, Top Tip Bio, youtube