Protein extraction and Quantitative analysis

소개글

Protein extraction and Quantitative analysis

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Material & Method
4. Result
5. Discussion
1) 뷰렛 시험 (biuret test)
2) Lowry 시험(Folin-Ciocalteau)
3) Kjeldahl법
4) UV법

6. Reference

본문내용

1. Abstract
이번 실험은 단백질을 추출해서 그 양을 측정하는 실험이다.
단백질을 정량화하기 위해 Bradford assay를 이용한다. Bradford assay는 Coomassie염료가 단백질과 결합하는 것을 이용해서 이 염료가 흡수하는 빛의 양을 측정함으로써 단백질의 농도를 추정하는 방법이다. 이미 알고 있는 단백질이 농도를 비교하기 위해 소혈청물질인 BSA를 먼저 알고 있는 시료대로 흡광도를 측정하여 Standard curve를 그리고 추세선 식을 이용하여서 농도를 계산 한다.
실험 방법은 당근의 Leaf, Stem, Root를 Heat shock 처리에 따라 총 6가지 조건으로 나온다. 각각의 sample에서 단백질을 추출하고 O.D값을 측정해 앞서 구한 Standard curve의 추세선 식에 대입하여 단백질의 농도를 구한다.
실험 결과 잘못된 실험인 2조의 결과를 제외 하고는 대부분의 조건에서 Heat shock 처리에 관계없이 비슷한 단백질의 농도가 측정되었다. 따라서 우리가 추출한 단백질은 sample의 모든 단백질이기 때문에 Heat shock 처리에 관계없이 추출 된다는 것을 알 수 있다.
이 실험을 통하여 단백질을 정량하는 Bradford assay를 알 수 있고 앞으로 이어지는 실험인 SDS-PAGE, Western blot을 통해 더욱더 자세히 각각의 단백질을 알아 낼 수 있다.

2. Introduction
이번 실험은 각각의 sample에서 단백질을 추출해서 정량하는 실험이다. 이 실험을 통해 단백질을 정량하는 Bradford assay를 알 수 있다. 그렇다면 이번 실험에서 정량하는 대상인 단백질에 대해서 자세히 알아보겠다.
[모든 생물에서 단백질은 20가지의 아미노산(amino acid)들이 연결되어 만들어진다. 그러나 이러한 아미노산들은 서로 다른 순서로 배열됨으로써 서로 다른 화학적 성질을 지닌 단백질을 만들어 내는데, 이는 문자의 배열순서가 바뀜으로써 서로 다르게 발음되는 단어를 만들어 내는 것과 같다.

참고 자료

①BROCK BIOLOGY OF MICROORGANISMS / MAKIGAN, PEARSON BENJAMIN CUMMINGS / 2008.11.07 / 12판 / 440쪽
②http://100.naver.com/100.nhn?docid=42522
③http://mybox.happycampus.com/nike0/371470