"히스티딘 태그" 검색결과 1-20 / 26건

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  [생화학실험] His–Tag 단백질의 정제 - Purification of His-tagged proteins

  공학적으로 단백질의 말단에 다수의 히스티딘을 첨가하면 단백질의 금속 이온 친 화성이 현저히 증가하여 쉽게 정제가 가능하다.그림 1 His-tag protein히스태그를 갖는 단백질 ... 순도로 회수 할 수 있다. 히스티딘은 태그가 매우 작으므로 다른 단백질에 결합되어도 단백질의 기능에 큰 영향을 미치지 않을 가능성이 높다.1) 장점① 태그가 매우 작다. 약 20 ... tag와 같이 사용 가능.- 벡터에 클로닝하지 않고 PCR등 히스티딘 6개 및 링커시퀀스를 달아 도입 가능② 대개 N or C 말단에 선택적으로 달아야 하는 tag와 달리 가리지 않

  리포트 | 6페이지 | 2,500원 | 등록일 2020.05.05 | 수정일 2020.08.12

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  친화크로마토그래피 실험 보고서

  히스티딘 태그/니켈, 글루타치온 전이 효소/글루타치온, 말토스 결합 단백질/말토스, 에피토프 태그히스티딘 태그/니켈(His-tag/Ni-NTA)- 단백질 유전자 조립을 통해 대상 단백 ... 에 결합되어있던 히스티딘 잔기를 가진 GFP가 용출될 수 있다.히스티딘 태그(His-tag) 삽입 방법- 단백질에 히스티딘 태그를 넣는 방법은 DNA 재조합을 통해 표적 단백질 ... 질에 히스티딘 6개의 태그를 붙여 니켈과 특이적 결합을 유도하고 다량의 imidazole이나 pH변화를 통해 대상 단백질을 용출할 수 있다. 장점으로는 대상 단백질에 영향이 적

  리포트 | 6페이지 | 1,500원 | 등록일 2021.03.25

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  Purification of HIS-TAG fusion protein관련 레포트 (A+자료)

  - 말단에 융합 된 6xHis 또는 폴리 -His- 태그를 갖는 재조합 단백질의 발현이다.히스티딘 잔기의 스트링이 특정 완충 조건 하에서 니켈, 코발트 및 구리를 비롯한 여러 유형 ... Purification of HIS-TAG fusion protein1) HIS-TAGHis-tag은 재조합 단백질 말단에 붙힌 여러 개의 histidine을 가르키는 말이 ... 가 금속이온과 결합을 잘한다. His-tag은 재조합 단백질의 발현벡터를 만다는 단계에서부터 부착 여부를 고려해야 한다. 재조합 단백질 염기서열의 앞부분이나 뒷부분에 여러 개

  리포트 | 5페이지 | 2,000원 | 등록일 2020.07.08

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  생명과학실험 단백질 정제 및 발현 실험보고서

  를 플라스미드 벡터에 삽입하여 숙주 세포에 도입한 후 발현되는 단백질이다. 내생적 단백질과 비교하여 과 발현이 가능하며, 정제를 용이하게 하기 위해 태그(tag)를 부착하여 정제 수율 ... - His tag : 아미노산 히스티딘이 여러개 위치하며 이를 통해 친화도 크로마토그래피를 거쳐 단백질을 정제한다.- Ori : DNA 복제 원점으로 중합효소가 위치한다.- Kan R ... hromatography(IMAC)를 이용한다. His tag가 부착된 재조합 유전자 단백질을 tag와 Ni이온의 친화도를 이용하여 정제한다.4. 실험 배경 이론a. 크로마토그래피이온 교환 (Ion

  리포트 | 5페이지 | 1,000원 | 등록일 2021.03.31

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  <연세대 A+> 연세대학교 일반생물학/공학생물학 실험(2) 결과레포트 - 7주차 Ni-NTA 아가로스 수지를 이용한 단백질 정제

  한 affinity tag인 His tag에서 히스티딘에 존재하는 질소는 음전하를 가져 Ni이온과 강하게 결합하게 된다. 따라서 정제하고자 하는 단백질에 이 tag를 부착하고 이를 레진 ... 것이다.다. 히스티딘을 제외한 fusion 단백질히스티딘을 제외하고 대표적으로 많이 사용되는 fusion 단백질로는 GST(글루타치온-S-transferase) tag이 있 ... hromatography)의 방법에 대해 그 원리를 이해하고, 이를 실험에 적용할 수 있다.다. 본 실험에 사용한 His tag-Ni(2+) 친화성 크로마토 그래피의 방법 뿐만 아니

  리포트 | 2페이지 | 1,500원 | 등록일 2020.09.14

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  [분자생물학실험]6X His tagged eGFP 단백질의 발현 및 정제와 단백질의 정량 및 정성적 특징 확인

  tag는 붙이고자 하는 단백질의 N-terminal 또는 C-terminal에 6개의 히스티딘을 붙이는 것으로 상대적으로 크기가 작기 때문에 단백질에 큰 영향을 주지 않 ... 는다. GFP에 tagging한 히스티딘 6개는 전이 금속 이온과 상호작용하여 히스티딘의 N과 배위결합을 형성한다. 원하는 단백질인 GFP를 E.coli에서 과발현으로 얻었을 때, GFP ... 6X His tagged eGFP 단백질의 발현 및 정제와단백질의 정량 및 정성적 특징 확인1. 실험 이론 및 원리가. 실험 소개일반적으로 살아있는 단일 세포에서 매우 빠른 생

  리포트 | 14페이지 | 5,000원 | 등록일 2021.03.06

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  GFP 단백질 정량과 SDS-PAGE 실험 레포트

  이다. 먼저 His tag란 히스티딘 6개를 통해 발현 또는 정제하려는 단백질의 N-terminal, C-terminal에 융합시키는 방식이다. (모두 융합 가능) 전이금속 ... -beer 식을 이용하여 구하는 Extinction coefficient assay, 표준곡선과 비교하여 농도를 구하는 Lowry assay, 단백질을 tagging하여 크기 ... buffer을 첨가하면 더 효과적으로 목적 단백질만을 채취할 수 있다. 이때 buffer의 pH를 7.5~8로 맞추는데 그 이유는 히스티딘의 pKa는 6.0으로 낮은 pH 상태

  리포트 | 12페이지 | 2,000원 | 등록일 2021.05.05 | 수정일 2024.03.14

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  [all a+] 연세대학교 공학생물학(2) 실험4 결과 레포트 (Miniprep)

  -tag, 히스택)와 니켈아가로즈 레진의 친화력을 통해 이뤄진다. 히스택은 히스티딘 아미노산 6개로 구성된 단백질 서열로 니켈아가로즈 레진과 배위결합을 형성한다. 니켈아가로즈 레진 ... hromatographyNickel-agarose affinity chromatography는 affinity chromatography의 한 종류로 히스티딘 잔기(histidine ... 에 표적 단백질이 있는 불순 용액을 부으면 히스티딘이 있는 표적 단백질만 결합기 때문에 정제가 가능하다. 이 후, elution solvent로 분리하여 표적 단백질을 니켈아가로즈 레진

  시험자료 | 5페이지 | 1,500원 | 등록일 2020.09.14

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  [생명과학실험]단백질 발현과 정제

  서열인 hexahistidine tag를 부착하고 His tag와 Ni-NAT bead의 결합을 통 해 단백질을 정제한다. 한 가지 종류의 크로마토그래피로 완전한 정제를 하기 어려 ... His tag가 부착되어있다. lysate를 흘 려보내면 니켈이온이 리간드로 작용하여 His tag를 지닌 단백질과 결합하게 되고 나머지는 흘려나간다.라. pET28a ... 만 선별하기 위함이다. 이 벡터에는 제한효소로 자를 수 있는 부위인 MCS가 존재하며 이것을 이용해 우리가 원하는 외부 유전자를 삽입할 수 있 다. 또한 6개의 히스티딘 염기서열

  리포트 | 4페이지 | 1,500원 | 등록일 2021.08.17

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  생화학실습 보고서(아미노산의 분리)

  상에 있는 단백질 등이 특정 화합물이나 항체 등에 결합하는 원리를 이용한다. concanavalin A, 전사인자, His tag가 그 예이다.High-Pressure Liquid ... 과 염기성을 띠는 히스티딘은 아래와 같다.실험 시약 및 기구에탄올은 탄소 원자, 수소 원자와 산소 원자(CH3CH2OH)로 이뤄진 술의 주성분이자, 광범위하게 사용되는 소독제 및 공업 ... 량은 132.12 g/mol인 단백질을 구성하는 아미노산의 하나로, 분자 내에 2개의 카르복시기(-COOH)를 갖는 산성 아미노산이다.히스티딘(His)은 C6H9N3O2 의 화학식

  리포트 | 6페이지 | 1,000원 | 등록일 2022.11.07

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  식품미생물학및실험 요점정리 <실험> [기말]

  onication을 통해 재조합 단백질이 있는 상층액을 얻는다.His Tag: 히스티딘이 6개 이상 연결 되어 있는 것을 뜻한다.원하는 재조합 단백질에는 His Tag이 존재한다. 이 외 ... 단백질들은 His Tag가 존재하지 않아 컬럼에 붙지 못하고 쉽게 빠져나간다.Ni-NTA와 결합하고 있던 재조합 단백질을 elution Buffer에 의해 용출되어 재조합 단백질

  시험자료 | 5페이지 | 5,000원 | 등록일 2022.06.27 | 수정일 2022.07.28

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  [일반생물학실험]Expression of recombinant α-synuclein gene

  된 His-tag를 elution시키는 역할을 한다. 그 다음 centrifuge해주고 상층액은 버린다. 상층액에도 90%정도의 α-syn이 있겠지만 버려주는데그 이유는 아랫부분에도 10 ... 은 300mM imidazole을 넣어주면 히스티딘보다 많은 양의 imidazole이 니켈과 결합할 것이므로 니켈과 결합해 있는 것들이 떨어질 것이다.6) elution buffer

  리포트 | 5페이지 | 2,000원 | 등록일 2020.08.27

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  [all a+] 연세대학교 공학생물학(2) 실험7 결과 레포트 (단백질 정제)

  하는 용액을 헷갈려 elusion buffer와 wash buffer를 거꾸로 사용했을 때에도 충분히 이러한 결과가 도출될 가능성이 있다.His Tag/Ni-NTA 기법은 단백질 ... 을 분리 정제할 때 자주 쓰이는 방법 중 하나이다. 이 방법의 장점과 단점에 대해 이야기해보려 한다. 먼저 가장 큰 단점이라면 히스택이 있는 물질을 확실히 걸러내는 만큼, 단백질 ... 를 바꿔보는 것도 하나의 방법이다.히스티딘을 제외한 fusion 단백질에는 ompF영역이나 단백질A, GST 등이 있다. lacZ유전자의 끝부분에 위치하는 ompF서열에서 암호

  시험자료 | 6페이지 | 1,500원 | 등록일 2020.09.14

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  Hit-tag protien의 정제

  하여 재조합 XUK(Saccharomyces cerevisae xylulo- kinase)를 His-tag(히스티딘 태그)를 사용하여 분리 정제하고자 한다.일반적인 c ... Ni-NTA affinity chromatography를 이용한His-tag protein의 정제Ⅰ. 서론본 실험은 Ni-NTA affinity chromatography를 이용 ... hromatography법은 수율이 매우 낮은 단점이 있으므로 재조합 단백질에 몇 개의 peptide tag이 융합된 fusion protein에 특별한 분리 정제 과정 없이 분리 정제

  리포트 | 4페이지 | 2,000원 | 등록일 2016.06.15 | 수정일 2016.06.17

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  생화학실험 (생화실) 친화 크로마토그래피 (affinity chromatography) 실험 레포트 입니다.

  로부터 분리, 정제하여 생물학적/생화학적 기능을 밝히는 데 많이 사용되고 있다.-

  리포트 | 5페이지 | 1,000원 | 등록일 2017.06.09

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  Ni-NTA agarose 수지를 이용한 단백질 정제

  - 히스티딘 이외에도 GST tag처럼 특이성과 사이즈가 모두 큰 fusion 단백질이 존재한다. 이런 단백질들을 정제했을 경우 태그를 일일이 잘라야 하는 수고가 있다.(4)- 정제

  리포트 | 3페이지 | 1,500원 | 등록일 2018.07.17

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  Protein Purification과 Electrophoresis(SDS-PAGE)

  지 않을 가능성 높음.- 게다가 MBP, thioredoxin, SUMO등과 같이 다른 affinity tag와 같이 사용가능.- 벡터에 클로닝하지 않고 PCR등 히스티딘 6개 및 ... 용출9) 친화성 크로마토그래피에서 ligand 와 단백질 사이의 친화성이 너무 높거나 낮으면 좋지 않음나. His-tag / Ni-NTA현재 재조합 단백질을 정제하는데 가장 많이 ... 는데(Ni고정-NTA사용)이런 성질을 이용해 단백질을 정제한다.1) 장점① 태그가 매우 작다. 약 20 아미노산.- 웬만하면 다른 Pro에 결합해도 단백질 기능에 큰 영향을 미치

  리포트 | 3페이지 | 1,500원 | 등록일 2017.03.01 | 수정일 2020.08.03

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  Protein purification

  을 resin으로부터 분리 할 수 있다. 본 실험에서는 정제하고자 하는 단백질에 미리 6개의 히스티딘을 표지하여서 대장균 내에서 발현시켰기 때문에 resin과 잘 결합할 수 있다. 이 때 ... 보다 Binding site도 많고 Ligand와 Ni의 결합도 적어 his_tag과의 affinity가 더 클 것이다. 때문에 IDA column을 사용한 실험에서는 Loading buffer ... 의 his-tag을 처리해 주었기 때문에 다른 것 같다. 이번 protein purification실험까지 끝내고 원핵실험을 마무리 했다. 막연하게만 느꼈던 microbe의 세계를 조금이나마 이해할 수 있었고, 이를 이용한 방법이나 기술들을 배울 수 있었던 시간이었다.

  리포트 | 3페이지 | 1,500원 | 등록일 2017.03.01 | 수정일 2020.08.03

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  시토키닌

  활성 표지 선별법 (Activation tagging screen)이 활성 표지 선별 방법은 Cauliflower 모자익 바이러스의35S 프로모터 enhancer 서열이 비교 ... DNA를 회수하여 전사 활성화된 유전자를 클로닝하는 방법이다.Figure 1 Schematic diagram of activation tagging식물에서 이 35S 프로모터 ... 정도를 증가시킴으로써 식물 호르몬인 오옥신 (auxin)에 비의존적으로 성장하는 기능 획득 돌연변이체를 얻어내고 이 방법을 활성 표지 (activation tagging)라고 이름지

  리포트 | 2페이지 | 1,000원 | 등록일 2013.09.03

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  Protein purification 단백질 정량

  하고 정제하는 과정이 필요하다.우선 정제하고자 하는 단백질에 6개의 히스티딘을 표지한 후 E. coli 내에 발현시켜 레진과 잘 결합을 시킨다. 따라서 우리는 실제 실험에서는 50ml ... tagged 단백질을 정제해낸다. 이 Ni이온을 NTA에 공유결합으로 붙여 다시 수지에 결합시켜 친화성 크로마토그래피 수지로 만든다. 이는 푸른색을 띤다. 이 결합은 이미다졸에 의해

  리포트 | 2페이지 | 1,000원 | 등록일 2015.06.20 | 수정일 2017.06.26

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