[공학]Plasmid/DNA 분리 정제

소개

Plasmid/DNA 분리 정제 실험입니다.

목차

서 론
실 험 방 법
실 험 결 과
고 찰

본문내용

서 론

실 험 이 론

1. 형질전환 (transformation)

유전형질의 변환

원핵세포에는 염색체 DNA외에는 작은 DNA가 발견된다. 보통 플라스미드(plasmid)라 불 리는 이들 DNA는 염색체 DNA보다 작고(4kb~100kb) 스스로 복제가 가능하며, 대부분 항 생물질에 대한 저항성을 나타내는 유전자를 포함하고 있다. 또 성인자 F 또는 F `으로 알 려진 플라스미드로 있으며 이들은 접합과정에서 다른 박테리아 세포로 옮겨 갈 수 있다. 플라스미드 DNA는 순수하게 분리 ․ 정제하기가 쉬우며 또 다른 박테리아 세포 안으로 집 어넣을 수 있다. 이렇게 인위적으로 플라스미드를 다른 박테리아에 감염시킬 수 있기 때문 에 이것을 이용하여 유전형질을 변화시킬 수 있다. 즉, 플라스미드 DNA를 다른 출처에서 얻은 DNA조각(유전자)을 삽입시켜서 재조합된 DNA를 만들 수 있으며, 이것을 CaCl₂로 처리한 박테리아의 세포벽 안쪽으로 밀어 넣을 수 있다.

Plasmid
많은 세균은 염색체 이외에 염색체보다 작지만 유전물질로서의 DNA를 가진 것으로 알려져 있다. 이 염색체 이외의 유전인자는 역시 복제에 의하여 안전하게 자손에게 이어지고 있다. 이런 세포질성 유전인자를 plasmid라고 총칭한다.
plasmid DNA도 염색체 DNA와 같이 환상의 2중나선을 가진 DNA로 세포 내에서는 더욱 꼬인 형태를 하고 있는 것으로 알려져 있다. 그람음성균, 양성균을 불문하고 많은 균에서 있다는 것이 알려져 있다. 일부는 선상이나 환상인 것도 존재한다.
plasmid는 물리적으로 독립하여 증식하는 단위이다. 이런 자기증식 능력을 가진 단위를eplicon이라 부른다. 세포내 염색체 당 플라스미드의 분자수를 copy number라 부르지만, 이 수는 가지각색이며, 일반적으로 플라스미드는 그 수가 많고 큰 전달성 플라스미드는 적다.
플라스미드 중에서 접합에 의하여 다른 세포에 옮기는 능력을 가진 것이 있다. 이것을 전달성 플라스미드, 또는 접합성 플라스미드라 한다. 대표적인 것으로 F plasmid나 R plasmid, colicin, plasmid등이 있다. 이들 플라스미드들은 sex pili를 만드는 능력을 가지고 있으며 접합은 이 sex pili를 통하여 일어난다. 한편 전달성이 없는 플라스미드는 비전달성 또는 비접합성 플라스미드라 부르고 있다. 전달 능력이 없는 플라스미드도 파지에 의한 형질전환으로 다른 균에 옮길 수 있다. 또한 전달성 plasmid와 공존하면, 자동화(mobilization)가 일어나 전달되는 것이 있다.

참고자료

· 없음