1.Purpose
2. Material & Method
3.Result
4. Discussion
5.* Further study
Lambert-Beer`s law는 무엇인가?
미지의 시료와 1cm 두께의 cuvet, 미지의 시험관이 우리에게 주어졌다. 미지의 시험관 두께를 어떻게 구할 수 있을까?
Chromatography의 원리는 무엇인가?
본문내용
Purpose
Chromatography의 원리를 이해하고 이를 통한 재료로부터 원하는 물질을 분리한다. 또한, 분석법의 원리를 이해하고 spectrophotometer의 사용법을 숙지하여 재료에서 나오는 여러 색소를 분석할 수 있다.
Material & Method
이 실험에서는 시금치 잎, Acetone, chloroform, hexane, diethyl ether, 액체질소, TLC판, TLC developing chamber, 막자사발, 비커, 깔대기, 거름종이, 증발접시, 시험관, 10ul pipet tip, 자와 칼, hair drier, E-tube, vortex, 원심분리기, 분광광도계, cuvet이 필요하다.
색소분리에는 크게 세 단계를 거치게 된다. 즉, 첫째, 시금치 잎으로부터 색소 추출액을 준비하고 둘째, Thin layer chromatography로 색소를 분리한다. 셋째, 이를 absorbance spectrum으로 각 색소를 분석함으로써 우리가 원하는 재료의 색소를 안다.
첫 단계인 시금치 색소 추출액을 준비하기 위하여 잎맥을 제거한 시금치 잎 5g을 준비한다. 여기서 잎맥을 제거하는 이유는 잎맥에 색소가 많이 없을 뿐만 아니라, 갈기 어렵기 때문이다. 준비한 잎을 막자사발에 넣고 액체질소에 얼린 후 고운 가루가 될 때까지 간다. 이후, Acetone 10ml을 넣고 막자로 갈다가 10ml을 더 넣고 계속 간다.(실제로 1ml pipet으로 Acetone을 10번씩 나누어 넣었다.) Acetone을 넣은 것은 잎의 색소를 녹이기 위함이다. 진한 녹색이 되면 Na2SO4 0.4g을 가하여 물을 제거시킨다. 이 때 액체질소로 인해 차가운 상태여서 고체인 Na2SO4가 잘 녹지 않기 때문에 세게 갈아주어야 한다. 다 갈린 후에는 거름종이에 거른 후 상온에서 건조시킨다. 아래의 사진처럼 덩어리 진 채로 떨어졌으며, 단시간에 건조시키기 위해 선풍기를 이용했다. 이 때 고온에서 건조시키면 색소가 단백질이므로 파괴될 수 있으므로 주의해야 한다
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