[생물학]일반생물학 및 실험 - 단백질 전기영동 레포트

소개글

일반생물학 실험인 단백질 전기영동에 관한
레포트입니다. 서울소재 상위권대학에서 A+를 받은
잘짜여진 레포트 입니다.
상세한 결과값과 사진자료, 그림자료들도
함께 포함되어 있으니 레포트 작성시 참고하시어
좋은결과 있으시길 바랍니다.

목차

1. 실험목적

2. 실험 원리
(1)단백질 분리와 전기영동
(2)아크릴아마이드 겔

3. 실험재료

4. 실험과정
(1)E.Coli

5. 실험결과

6. 고찰

7. 참고문헌

본문내용

1. 실험목적
(1)전기영동의 원리를 설명할 수 있다.
(2)전기영동을 이용하여 단백질을 분리 및 분석할 수 있다.
(3)전기영동을 통해 단백질의 특성을 설명할 수 있다.
2. 실험 원리
(1)단백질 분리와 전기영동
단백질을 분리하는 방법은 분리하고자 하는 단백질이 무엇인가에 따라서 매우 다양하다. 단백질이 핵에 존재하는지 세포질에 존재하는지에 따라서, 도 단백질의 성질에 따라서 적당한 방법을 선택하여 써야 한다. 가장 처음에는 조직이나 세포로부터 핵단백질이나 세포질단백질 또는 전체단백질을 분리하는 것으로 시작하며, 이로부터 수많은 정제과정을 거쳐야 원하는 단백질을 분리할 수 있다.
전기영동은 주로 생체 고분자들의 성질을 연구하고, 그것들을 분석, 분리, 정제하는 중요한 방법 중에 하나이다. 전기영동은 DNA, RNA나 단백질 같은 것들이 고유의 전하를 띠고 있고, 그것의 이동 정도는 각 물질의 크기나 모양 그리고 저하에 따라 달라진다. 즉, 크기가 큰 물질은 크기가 작은 물질보다 더 천천히 통과하기 때문에 크기에 따라 물질들이 분리된다. 아크릴아마이드는 크기가 작은 물질을 높은 해상도로 구분할 수 있는 장점이 있고, 아가로오스는 해상도는 낮지만 아주 넓은 범위(200bP ~ 50kB)의 DNA나 RNA 시료를 분리할 수 있다는 장점이 있다. 단백질 전기영동의 기본 원리는 DN나 RNA 전기영동의 원리와 같다. 다만, 단백질을 변성시키기 위해 우레아나 포름아마이드 대신 SDS를 이용한 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동을 주로 이용한다는 것과 단백질을 눈으로 확인하기 위하여 EtBR 대신 쿠마시 블루(coomassie blue)나 실버(silver)염색방법을 쓰거나 항체를 이용한다는 것 등이 다른 점이다. 쿠마시 블루 염색에 의한 겔 상의 단백질 띠 검출은 염색제(dye)와 단백질 간의 비특이적 결합에 의한 것이며 0.3 ~ 1㎎의 단백질까지 인식할 수 있다. 실버 염색은 실버와 단백질 안의 화학 잔기 간의 결합에 의한 것으로 2 ~ 5㎎정도의 단백질까지 인식할 수 있다.
(2)아크릴아마이드 겔
아크릴아마이드 겔은 DNA또는 단백질의 전기영동에 이용될 수 있는데, 특히 단백질의 경우는 SDS(sodiun dodecyl sulfate)를 포함한 SDS-PAGE(polyacrylamide gel electrophoresis)를 실시한다. polyacrylamide gel은 acrylamide 측쇄 기능기가 N,N′-methylenebisacrylamide 와 같은 2개의 기능기를 가지는 화합물에 의해 교차연결(cross-link)되어서 형성된 POLYMER이다.

참고 자료

없음