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[미생물학 실험] 세균의 생화학적 성상검사

미생물학 실험 중 생화학적 검사에 따라 세균을 분리동정하는 실험을 3주에 걸쳐서 해보았습니다 실험과정이나 결과, 고찰 등은 제외하고 검사법의 이론들에 대해서만 모아 놓았습니다 많은 도움 되시길 바래요^^ 검정색 네모들로 보이느 것들은 한글 내 기호문자여서 그러는겁니다^^ 좋은 평가도 부탁드립니다
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최초등록일 2005.07.14 최종저작일 2005.06
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[미생물학 실험] 세균의 생화학적 성상검사
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    소개

    미생물학 실험 중 생화학적 검사에 따라 세균을 분리동정하는 실험을 3주에 걸쳐서 해보았습니다
    실험과정이나 결과, 고찰 등은 제외하고 검사법의 이론들에 대해서만 모아 놓았습니다
    많은 도움 되시길 바래요^^
    검정색 네모들로 보이느 것들은 한글 내 기호문자여서 그러는겁니다^^
    좋은 평가도 부탁드립니다

    목차

    1) 배지상에서 집락(colony)의 성상
    (1) 적혈구에 대한 용혈 (hemolysis)
    (2) 색소생성 (pigment production)
    (3) 운동성 (motility)

    2) 발광작용 (luminescence)

    3) 탄수화물 분해시험
    (1) diastase
    (2) saccharase
    (3) lactase
    (4) methyl red 반응 (MR reaction)
    (5) voges-proskauer 반응 (VP reaction)
    (6) ONPG 시험 (O-nitrophenyl-■-D-galactopyranocide test)
    (7) phenol red broth base (Barsikow)
    (8) OF 시험 (oxidation fermentation test)
    (9) bile esculin(aesculin) 시험
    (10) TSI agar test

    4) 단백질의 분해작용
    (1) 요소분해 시험 (urease test)
    (2) 황화수소 (hydrogensuleide)
    (3) PPA(phenyl pyruvic acid)반응과 IPA(indole pyruvic acid)반응
    (4) indole 반응시험
    (5) 아미노산의 탈탄산시험
    (decarboxylase tests; lysine-ornithine-arginine and dehydrolase test)

    5) 균체의 효소 검사
    (1) 혈장응고효소(coagulase) 시험
    (2) gelatin 액화시험 (gelatin liquefaction test)
    (3) DNase 시험 (deoxyribonuclease test)
    (4) phosphatase 시험 (phosphatase test)
    (5) Nagler 또는 L,V 반응
    (6) Kanagawa phenomenon
    (7) CAMP 시험 (Christie, Atkinand Munch-Petersen test)
    (8) oxidase 시험 (oxidase test)
    (9) catalase 시험
    (10) amidase 시험

    6) 기타 대사에 관한 반응
    (1) citrate 이용능력 (carbon source utilization test)
    (2) malonate 이용능력
    (3) 질산염 환원 시험 (nitrate reduction test)
    (4) gluconate 시험
    (5) Niacin(nicotinic acid) 시험
    (6) X 인자(X factor), V 인자(V factor) 요구성
    (7) hippurate 가수분해시험 (hippurate hydrolysis test)

    7) 화합물질과 온도에 대한 감성도 시험
    (1) KCN 시험 (potassium cyanide test)
    (2) bacitracin(Taxo A) 감수성 시험
    (3) ethylhydrocuprein (EHC 또는 optochin) 시험
    (4) 항생물질 감수성
    (5) fuchsin 및 thionine 감수성
    (6) 담즙용해시험 (bile solubility test)
    (7) 질화나트륨() 감수성검사
    (8) 식염에 대한 내염성과 호염성 시험
    (9) 균의 생존력(survival) 시험 및 온도에 의한 발육유무
    (10) PHB 시험 (poly-P-hydroxy butyric acid test)
    (11) O/l29 감수성시험
    (12) Tween 80 가수분해 시험
    (13) 또는 감수성 시험

    본문내용

    1) 배지상에서 집락(colony)의 성상
    (1) 적혈구에 대한 용혈 (hemolysis)
    혈액 한천배지상에서 적혈구에 대한 용혈상태로 ■, ■, ■용혈을 관찰할 수 있다.
    ① ■용혈: 폐렴 구균이나 viridans군의 ■용혈성 연쇄구균(Streptococcus salivarius, S. sanguis, S. mitis)에서 집락 주위가 녹색대(green zone)을 나타내는 부분용혈 (partial hemolysis)을 볼 수 있다.
    ② ■용혈: ■용혈성 연쇄구균(■-hemolytic streptococci group ABC등)에서 볼 수 있고 집락 주위는 적혈구의 완전용혈(complete hemolysis)에 의하여 투명한 용혈대를 볼 수 있다.
    ③ ■용혈: ■용혈은 용혈이 없는 상태를 말한다.
    ④ 기타 포도상 구균에서 ■, ■, ■, ■의 용혈소를 나타낸다.

    (3) 운동성 (motility)
    ① 반고체배지 (semisolid medium)
    주로 Gram 음성 간균 중 장내 세균의 운동성 감별에 agar를 0.3~0.5% 첨가한 반고체 배지(semisolid medium)를 사용하며, 근자에 다목적 성상을 갖는 SIM, OIM, LIM배지상에서 배지가 혼탁되었을 때 운동성이 있고, 천자부분만 균이 자라면 운동성이 없는 것으로 균감별에 이용된다.
    ② 현적표본 (hanging drop)
    a. Cover glass 네 모퉁이에 waseline을 조금씩 바른다.
    b. Cover glass 중앙부에 균부유액을 1 방울 놓는다.
    c. 오목 파여진 slide g1ass(hole slide glass) 중앙의 홈부분이 균액이 있는 중앙에 오게 덮고서 즉시 뒤로 젖혀 100배~400배로 관찰하면 고유운동을 볼 수 있다. 이와 같이 hole slide glass 위의 cover glass의 균부유액이 매달린 상태로 관찰되므로 현적표본(hanging drop preparation)이라고 부른다. 배양시간이 오래되지 않은(18시간 이내) 것이 운동성이 좋다.
    ③ 편모 또는 섬모
    편모는 미생물에 있어 중요한 운동기관이다. 그러므로 편모의 유무는 세균분류와 동정에 중요하고, 아울러 편모가 있으면 부착상태로 단모성,양모성, 총모성, 주모성인지를 확인하여야 한다. 아울러 섬모도 하나의 운동기관이다.

    참고자료

    · 일반미생물학, 개정판, 형설출판사
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