생화학 실험/실습 보고서 (완충용액과 산성도)

소개

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목차

[1] 실험 목적
[2] 이론
[3] 실험 시약 및 기구
[4] 실험 방법
[5] 실험 결과
[6] 고찰
[7] 참고문헌

본문내용

[1] 실험 목적
직접 완충 용액을 제조해보고, 이 용액이 실제로 완충의 역할을 하는지 pH 변화를 pH meter로 확인하고자 실험을 진행했다.

[4] 실험 방법
① 완충액 만들기 (준비 과정)
1) 100mL 비커에 anhydrous sodium acetate(M.W.=82) 1.64g을 넣고 약 50mL의 증류수로 녹인다. 이 때 유리 막대를 이용하여 저어가며 녹인다
2) 50mL 메스플라스크에 1.2mL의 진한 빙초산(acetic acid 17M)을 가하고 증류수로 희석하여 최종 volume 50mL로 만든다 (증류수를 가져가 후드 안에서 희석한 후 가지고 나온다)
② pH meter 8000 보정하기
1) pH meter의 전극을 증류수로 씻고 티슈(킴테크)로 물기를 제거한다
2) pH 7의 standard solution에 전극을 담근 후, 7이 되면 표시 화면이 깜빡거릴 때까지 Calibration 버튼을 길게 누른다
3) pH 4의 standard solution에 대해 ②-1)과 ②-2)의 과정을 반복한다 (표시 화면이 깜빡거리지 않는 것을 확인한 후 전극을 씻어둔다)
*(OHAUS/STARTER2100)은 pH 4 → pH 7 순서로 보정
③ 완충액 만들기 (0.2M sodium acetate 완충액 pH 4.7)
1) 앞서 만들어 둔 ①-1)의 sodium acetate 용액의 pH를 기록한다
2) ①-2)의 희석된 acetic acid를 소량씩 넣으며 가한 양에 따른 pH 변화를 기록한다 (pH가 4.7이 될 때까지 첨가한다)
*acetic acid를 첨가할 때 유리 전극은 용액에서 빼고 측정 시에 다시 넣을 것
3) 100mL 메스플라스크에 옮겨 담은 후, 증류수로 최종 부피가 100mL가 되도록 희석한다
④ 완충액의 완충작용 확인하기
1) 0.2M NaCl 수용액을 50mL 비커에 10mL 담아 pH를 측정한다
2) 1N HCl을 0.25mL를 마이크로피펫으로 가한 후 다시 pH를 후드에서 측정한다
3) NaCl 수용액 대신 ③의 0.2M sodium acetate 완충액으로 ④-1), 2)의 과정을 반복한다

참고자료

· Jeremy M. Berg, John L. Tymoczko, Gregory J. Gatto, Jr., Lubert Stryer, Stryer 생화학, 9판, 범문에듀케이션, 2020, P.18
· 박인국, 생화학 길라잡이, 2판, 라이프사이언스, 2018, P.29
· 네이버 지식백과 두산백과, sodium acetate
· 네이버 지식백과 화학대사전, acetic acid
· 네이버 지식백과 생화학백과, 수소 이온 농도 지수
· 네이버 지식백과 생화학백과, buffer
· 네이버 지식백과 화학백과, Henderson-Hasselbalch equation
· 네이버 지식백과 화학백과, pH meter
· 네이버 지식백과 화학백과, 르샤틀리에 원리