[생화학] 단백질(protein) 분석실험(전기영동포함)

소개

꽤나 자세히 적었구요...
사진자료도 제법 첨부되어 있습니다.
표지도 만들었는데, 파일이 달라서 못올리겠네요...
그럼 열심히~~! 도움이 되셨기를

목차

1. 실습제목

2. 실습목표

3. 실습이론
1). Buffer
2). 세포의 파괴와 분획
3). 단백질의 가용화 법(막단밸질의 가용화 방법)
① 계면 활성제에 의한 가용화 원리
② 계면활성제의 종류
4). 단밸질 정량법(Bradford 법)
5). Polyacrylamide gel(SDS-polyacrylamide gel electrophoresis;SDS-PAGE)
6). 단백질의 염색

4. Procedure

5. Content of solutions & 그 용도

6. 실습 결과

7. Discusstion

본문내용

1. 실습 제목
Protein isolation & separation

2. 실습 목표
● Protein을 Isolation 해서 Gel-electrophoresis를 할 수 있다.
● 각 장기별로 존재하는 Protein의 차이를 알 수 있다.

3. 실습 이론
1). Buffer
단백질을 용액상태에서 취급할 때에는 통상 어떤 buffer(수소이온 buffer)를 사용하게 된다. 단백질용액의 pH를 조절하는 목적은 단백질의 안정화, 효소 등의 활성 측정, 각종 크로마토그래피의 조건 설정 등 여러 가지가 있으므로 목적에 맞추어 buffer를 선택할 필요가 있다. 그러나 빈번하게 사용되고 있는 buffer의 종류는 한정되어 있어 몇종류의 완충제로서 대부분의 실험에 대응하고 있다.
Buffer를 선택할 때에는 사용하는 pH가 가장 중요한 조건이다. 완충제가 가지고 있는 완충능력은 pKa(해리정수의 역대수)가 최대로 되며 여기서부터 벌어지는 정도에 따라 낮아지게 되기 때문에 사용하는 pH에 따라 완충제의 종류는 제한된다. 일반적으로 pKa±0.5 정도의 pH 범위에서 유효한 완충 작용이 얻어지며, ±1 이상 벌어진 영역에서의 사용은 희망적이지 않다. 또한 온도, 완충제의 농도 혹은 buffer의 이온조성 변화에 의해 buffer의 pH가 변동하게 되는데, 이 변동을 적게 하는 것이 중요한 경우가 종종 있다.

참고자료

· 단백질 실험노트(상, 하) - 김승호, 장규태 역(월드사이언스)
· 실험생화학 - 대한생화학·분자생물학회
· Histology - Michael H. Ross 저(군자 출판사)
· Yahoo search "electrophoresis"