Cell Seeding and Subculture(세포배양, 계대배양) 결과레포트

소개

생명과학과 전공실험에서 진행한 실험 결과 레포트 입니다:)
A+ 받은 레포트이며 조교님께 완성도있다는 칭찬을 받았던 레포트입니다.

상세하게 적은 부분이 많고 이론, 실험재료나 방법들도 보시면 아시다시피
처음보는 사람도 이해할 수 있게 자세하고 폭넓은 정보를 적으려한게 느껴지실 겁니다.

책을 하나하나 찾아보며 적은 것이기 때문에 참고문헌 각주표시도 되어있습니다.

참고하시면 반드시 도움이 되실거라 생각합니다.
이 보고서를 보신 분은 꼭 A+ 받으시고 좋은 하루 되세요 ㅎㅎ 감사합니다:)

목차

1. 실험목적

2. 실험원리

3. 실험재료 및 방법
1) 실험재료
2) 실험기기 및 장비
3) 실험방법

4. 결과

5. 고찰

6. 참고문헌

6. 퀴즈

본문내용

2.실험원리
1)Cell culture
세포배양은 Mammalian cell culture와 Non-mammalian cell culture을 포함한 Animal cell culture와 plant cell culture로 나눌 수 있다. 동물세포의 배양은 세포를 분리한 후 일정기간 배양하고자 하는 초대배양(Primary cell culture)과 cell line을 계속해서 배양하는 계대배양(cell subculture) 등이 있다. 인위적인 인공배지 환경에서 세포밀도가 80% 이상이 될 때 새로운 dish에 희석하여 옮기는 과정을 culture라고 한다. 희석율이나 계대간격을 알기 위해서 실험에 있어 성장곡선*을 파악하며 진행한다. 유도기, 대수기, 정체기, 사멸기 중 대수기의 끝무렵 때 계대 timing을 잡는 것이 적당하다. 환경에 따라 서서히 사멸하기도, 증식하기도 하기 때문에 양호한 유지를 위해서 정체기에 오래 두지 않는 것이 중요하다.
D.T = ( (T-T0)log2 / logN ) – logN0 이때, N0: doubling되기 전의 배양시간, T0: 처음세포수, T: 나중세포수, N: doubling되는데 걸린 배양시간이다.
성장곡선: 각 cell line의 lag phase(유도기)기간, log phase(대수기)의 doubling time, Plaqea에서의 saturation density를 파악할 수 있도록 성장곡선을 결정하여 이후 실험을 계획하는 것이 중요하다.

<중 략>

실험방법 - Subculture / Cell seeding / Cell counting
*세포 실험은 clean bench에서 진행하고 작업대와 실험자의 손을 70% 에탄올로 소독한 뒤 진행한다. 또한, 실험 전에는 필요한 media 등은 미리 30분 전 37℃ water bath에 담가 둔다. 실험을 진행하면서 세포액이 dish 뚜껑에 묻지 않도록 주의하고, 최대한 dish위로 손이나 기구들이 지나치지 않도록 주의한다.
1. subculture하기 전 현미경으로 cell의 morphology를 관찰한다.
2. Micropipette을 이용하여 dish안의 배양 배지를 suction한다. 이때, dish를 기울이고 tip의 끝이 세포에 직접적으로 닿지 않게 벽에

참고자료

· 서한극, 2007, 배양세포실험 핸드북, pp. 45, 68, 71-72, 105-106, 월드사이언스.
· 김태전 외2, 2004, 세포배양학개론, pp. 175, 202-212, 227, 241-244, 248, 251, 255-263, 고려의학.
· 오계헌, 2016, Brock의 미생물학, p191, 바이오사이언스출판.
· Invitrogen 외1, Cell Culture Basics Handbook, pp. 41-42, Life technologies.