소개글
생명과학과 전공실험에서 진행한 실험 결과 레포트 입니다:)
A+ 받은 레포트이며 조교님께 완성도있다는 칭찬을 받았던 레포트입니다.
상세하게 적은 부분이 많고 이론, 실험재료나 방법들도 보시면 아시다시피
처음보는 사람도 이해할 수 있게 자세하고 폭넓은 정보를 적으려한게 느껴지실 겁니다.
책을 하나하나 찾아보며 적은 것이기 때문에 참고문헌 각주표시도 되어있습니다.
참고하시면 반드시 도움이 되실거라 생각합니다.
이 보고서를 보신 분은 꼭 A+ 받으시고 좋은 하루 되세요 ㅎㅎ 감사합니다:)
목차
1. 실험목적
2. 실험원리
3. 실험재료 및 방법
1) 실험재료
2) 실험기기 및 장비
3) 실험방법
4. 결과
5. 고찰
6. 참고문헌
6. 퀴즈
본문내용
2.실험원리
1)Cell culture
세포배양은 Mammalian cell culture와 Non-mammalian cell culture을 포함한 Animal cell culture와 plant cell culture로 나눌 수 있다. 동물세포의 배양은 세포를 분리한 후 일정기간 배양하고자 하는 초대배양(Primary cell culture)과 cell line을 계속해서 배양하는 계대배양(cell subculture) 등이 있다. 인위적인 인공배지 환경에서 세포밀도가 80% 이상이 될 때 새로운 dish에 희석하여 옮기는 과정을 culture라고 한다. 희석율이나 계대간격을 알기 위해서 실험에 있어 성장곡선*을 파악하며 진행한다. 유도기, 대수기, 정체기, 사멸기 중 대수기의 끝무렵 때 계대 timing을 잡는 것이 적당하다. 환경에 따라 서서히 사멸하기도, 증식하기도 하기 때문에 양호한 유지를 위해서 정체기에 오래 두지 않는 것이 중요하다.
D.T = ( (T-T0)log2 / logN ) – logN0 이때, N0: doubling되기 전의 배양시간, T0: 처음세포수, T: 나중세포수, N: doubling되는데 걸린 배양시간이다.
성장곡선: 각 cell line의 lag phase(유도기)기간, log phase(대수기)의 doubling time, Plaqea에서의 saturation density를 파악할 수 있도록 성장곡선을 결정하여 이후 실험을 계획하는 것이 중요하다.
<중 략>
실험방법 - Subculture / Cell seeding / Cell counting
*세포 실험은 clean bench에서 진행하고 작업대와 실험자의 손을 70% 에탄올로 소독한 뒤 진행한다. 또한, 실험 전에는 필요한 media 등은 미리 30분 전 37℃ water bath에 담가 둔다. 실험을 진행하면서 세포액이 dish 뚜껑에 묻지 않도록 주의하고, 최대한 dish위로 손이나 기구들이 지나치지 않도록 주의한다.
1. subculture하기 전 현미경으로 cell의 morphology를 관찰한다.
2. Micropipette을 이용하여 dish안의 배양 배지를 suction한다. 이때, dish를 기울이고 tip의 끝이 세포에 직접적으로 닿지 않게 벽에
참고 자료
서한극, 2007, 배양세포실험 핸드북, pp. 45, 68, 71-72, 105-106, 월드사이언스.
김태전 외2, 2004, 세포배양학개론, pp. 175, 202-212, 227, 241-244, 248, 251, 255-263, 고려의학.
오계헌, 2016, Brock의 미생물학, p191, 바이오사이언스출판.
Invitrogen 외1, Cell Culture Basics Handbook, pp. 41-42, Life technologies.