[생화학] 생화학실험(cell counting/RNA정량법/PCR/전기영동)

목차

1. Cell counting (By hemacytometer)
(1)이용방법
(2)계산방법

2. RNA 정량방법
(1) RT-PCR : RNA 특정 부위 증폭시키기
(2) QC-PCR : RNA 정량하기

3. PCR 원리 / PCR 수율에 미치는 요인
(1) PCR의 원리
효소
반응 사이클
검출감도
(2) PCR 수율에 미치는 요인
반응온도
Primer

4. DNA eletrophoresis
원리
종류
방법
DNA의 이동에 영향을 주는 요인들

본문내용

1. Cell counting (By hemacytometer)

세포 수를 측정하는 방법 중에서 직접 측정하는 방법에는 hemacytometer(그림)를 이용하는 것, 형성된 colony에 희석배율을 곱하여 생균수만을 측정하는 고체배지 이용법 두 가지가 있다. 여기서는 hemocytometer 이용법에 대하여 자세히 알아보자.

(1) 이용방법
① 먼저 슬라이드글래스를 Hemacytometer위에 올려놓는다.
② 그림에서 보듯 카운팅그리드가 있는 한쪽 끝에 홈이 있다.(삼각형모양) 그 홈으로 세포가 담겨진 미디어를 떨어뜨리면 모세관 현상으로 인해 슬라이드글래스와 Hemacytometer로 미디어가 빨려들어 간다.
③ 그림에서 정사각형 안에 9개의 정사각형이 있는데, 그 한 정사각형에 들어가는 미디어의 부피는 0.1 마이크로리터 이다.
④ 임의의 정사각형에 들어있는 세포의 숫자를 현미경으로 보면서 센다.
⑤ 예를 들어 그 한 정사각형 안에 100개가 들어있으면 그 세포의 농도는 0.1 마이크로리터당 100개가 있는 것이므로 1000000개/ml의 농도가 될 것이다.

참고 자료

없음