[A+ 리포트] 6well plate를 이용한 Cell counting and seeding에 관한 실험 프로토콜

소개

본 리포트는 6well plate를 이용한 cell counting 및 seeding에 관한 실험 프로토콜 리포트입니다.
참고 바랍니다.

목차

1. Meterial Preparation
2. Media suction
3. PBS washing
4. Adding Trypsin-EDTA (Trypsinization)
5. Collecting detached cells
6. Centrifuge
7. Supernatant Suction (Media suction)
8. Resuspension
9. Seeding
10. Observation of cells using Trypan blue solution and Hemocytometer

본문내용

1. Material Preparation
본격적인 실험 시작에 앞서 clean bench의 UV 램프와 Fan을 먼저 작동시킨 뒤 UV 램프를 끄고 형광등을 켜서 내부를 소독한다.
- 실험 재료 및 기구 : culture medium(이상 DMEM), 50ml conical tube, 15ml conical tube, water bath, microscope, 70% ethanol, 티슈, rack, clean bench, HeLa cell이 subculture되어 있는 cell culture dish, suction 기기, pipette tip(blue, yellow, white), 1X PBS, 10ml serological pipette, pipette aid, 0.25% Trypsin-EDTA, micropipette(P1000, P200, P20, P10), CO2 Incubator, 타이머, centrifuge 기기, 6well plate, 네임펜, ep-tube, microscope(with monitor), hemocytometer, cover glass, KIMTECH wiper, Trypan blue.
1) 37℃로 설정된 water bath에서 실험에 사용될 culture medium이 담긴 50ml conical tube를 37℃의 온도로 유지시킴.
※ 참고사항 : 세포 배양 시 냉장 보관되어 있던 culture medium을 그대로 사용하게 되면 cell에 stress가 가해질 수 있기 때문에 세포 배양 온도와 동일한 37℃로 일치시킴.

참고자료

· 없음