서울대학교 단학기 생물학실험 - 모듈3 레포트

소개글

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1. E.Coli Transformation
2. Colony PCR
3. Restriction & Gel Electrophoresis

생명과학부 부전공이고, 4학년에 1학년 교양을 들은 거라 내용이 부족하진 않을 겁니다

목차

1. Abstract

2. Introduction

3. Materials and Methods
3-1. E.Coli Transformation
3-2. Colony PCR
3-3. Restriction & Gel Electrophoresis

4. Results
4-1. E.Coli Transformation
4-2. Colony PCR 및 Restriction & Gel Electrophoresis

5. Discussion
5-1. E.Coli Transformation
5-2. Colony PCR
5-3. Restriction & Gel Electrophoresis

본문내용

1. Abstract
DNA technology는 분자생물학에서 중요한 부분을 차지한다. 이번 실험에선 cloning의 전체적인 과정(transformation, colony PCR, gel electrohphoresis)을 순차적으로 학습하였다. 첫 실험에선 transformation을 수행하였다. 4종류의 plasmid으로 E.Coli를 transformation 하였고, 이를 incubation하여 E.Coli colony를 얻었다. 두 번째 실험은 colony PCR이었다. 첫 실험에서 얻은 E.Coli colony를 template으로 사용해 PCR을 수행했고, product를 보관하였다. 세 번째 실험은 restriction & gel electrophoresis이다. 두 번째 실험에서 얻은 PCR product과 4종류의 plasmid의 no cut / cut version을 agarose gel에 loading하고 electrophoresis하여 그 결과를 uv로 확인하였다.

2. Introduction
생물학에서 cloning은 실험의 기본에 해당한다. Cloning을 통해 우리가 원하는 형질을 가지게 된 세포를 얻으면, 이를 통해 다양한 실험을 수행할 수 있다. Maxiprep/miniprep 등을 통해 vector를 복제할 수 있고, overexpression을 통해 원하는 gene product를 고농도로 얻을 수도 있다. 또한, 특정 gene의 역할을 연구하는데도 사용될 수 있다. 이렇듯 발전된 DNA technology는 생물학의 발전에 크게 기여했다. 이번 실험에서 Cloning에 사용되는 가장 기본적은 techniques들을 학습한다.
모듈3의 첫 실험은 E.Coli transformation이다. 미리 준비된 plasmid를 vector로 사용해, E.Coli를 transformation 하는 것이다.

참고 자료

Michael J. Simmons et al., Principles of Genetics (6th Edition) John Wiley & Sons: University of Minnesota, 439-476 (2012).
Pei Yun Lee et al. Agarose Gel Electrophoresis for the Separation of DNA Fragments. J. Vis. Exp. 62(3923), 1-5 (2012).
Nancy C. Stellwagen et al. Effect of the Matrix on DNA Electrophoretic Mobility. J. Chromatogr. A. 1216(10), 1917-1929 (2009).