PCR 기반 Specific Human DNA 증폭 및 검출 실험 결과보고서
- 최초 등록일
- 2022.09.18
- 최종 저작일
- 2022.06
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소개글
"PCR 기반 Specific Human DNA 증폭 및 검출 실험 결과보고서"에 대한 내용입니다.
목차
1. 실험 제목
2. 실험 방법
3. 실험 결과
4. 고찰
5. 결론
6. 참고문헌
본문내용
1. 실험 제목
PCR 기반 Specific Human DNA 증폭 및 검출
2. 실험 방법
1) DNA extraction
① 1 mL의 protease solution (1/1000로 희석된)을 E.P tube에 넣는다.
② 면봉을 사용해 구강 천장을 긁어 세포를 모은다.
③ 면봉 끝에 모아진 세포를 protease solution에 넣는다.
(면봉을 우측 그림과 같이 짜서 용액을 최대한 모아준다.)
④ Solution을 37℃에서 30분간 incubation 한다.
⑤ 4개의 EP tube에 200μL 씩 나눠 담는다.
⑥ 20 μL의 sodium acetate와 500 μL의 100% Ethanol을 ⑤에 준비된 용액에 첨가한다.
⑦ Vortexing 후 -80℃에서 15분간 냉각시킨다.
⑧ 15,000 rpm, 4℃에서 15분간 centrifuge한다.
⑨ 상층액을 제거한 뒤 1mL의 70% ethanol을 넣는다.
⑩ 15,000 rpm, 4℃에서 2분간 centrifuge한다.
⑪ 상층액을 제거한 뒤 침출된 DNA를 15분간 상온에서 건조시킨다.
⑫ 100μL의 water로 tube(1)에만 넣어 DNA를 풀어준 뒤, tube(1)의 용액을 다음 튜브로 옮겨 가며 (tube(1)→tube(2)→tube(3)→tube(4)) 나머지 tube의 DNA를 풀어 하나로 만든 뒤 vortexing 해준다. (최종적으로 tube(4)에서 100μL의 DNA 용액을 얻을 수 있음)
참고 자료
백인호 et al, J Korean Neuropsychiatr Assoc, Vol 37(1), pp.149-158 (1998)
우정임 et al, 한국생물교육학회지, 39(3), pp. 439-455 (2011)
Rong Chen et al, Indian J Microbiol, 54(1), pp.74-79 (2013)
화공생물공학과 교수진, “화공생물공학 단위조작실험”, 동국대학교 화공생물공학과, 2022, pp.62-67
