유전발생생물학실험_immunofluorescence

목차

1. 서론

2. 재료 및 방법
1) 재료
2) 방법

3. 결과

4. 논의

본문내용

Immunofluorescence(IF)는 형광단으로 태그된 특정 항체를 통해 세포 현탁액, 배양 세포, 조직 또는 전체 유기체, 특정 단백질과 같은 많은 구성 요소를 시각적으로 관찰하는 기술이다 (Im et al., 2019). 이는 많은 질병 연구, 약물 개발에서 이용 되고 있다 (Im et al., 2019).
IF는 다음과 같은 과정으로 이루어진다. 먼저, 세포를 고정하고, permablization을 통해 antibody가 결합할 수 있게 한다 (Donaldson, 2001). 비특이적 결합을 막기 위해 blocking 과정을 거친 후, fluorescent-tagged antibody과 원하는 target에 직접 붙는 방법인 Direct Immunofluorescence(DIF) 혹은 1차 항체, 2차 항체를 활 용하여 target image를 획득하는 indirect immunofluorescnece 방법이 있다 (Donaldson, 2001; Odell·Cook, 2013). DIF의 경우, 감염된 조직같은 nonantibody target을 탐지하는데 이용될 수 있다 (Odell·Cook, 2013). 비록, DIF의 경우 빠르 고 꽤 정확하지만, 제한된 항체만이 특정 target에 결합할 수 있기 때문에 Indirect immunofluorescence를 주로 사용한다 (Odell·Cook, 2013).

참고자료

· 강영희. 2008. 생명과학대사전. 아카데미서적, p.2320.
· Cao et al. 2020. The involvement of stress granules in aging and aging-associated diseases. Aging cell 19(4), pp.1-20.
· Donaldson. 2001. Immunofluorescence staining. Current protocols in cell biology. pp.1-9.
· Im et al. 2019. An Introduction to Performing Immunofluorescence Staining. Methods in molecular biology 1897, pp.299–311.
· Kapuscinski. 1995. DAPI: a DNA-Specific Fluorescent Probe. Biotechnic & Histochemistry 70(5), pp.220-233.
· Koley·Bard. 2010. Triton X-100 concentration effects on membrane permeability of a single HeLa cell by scanning electrochemical microscopy (SECM). Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 107(39), pp.16783–16787.
· Mahboubi·Stochaj. 2017. Cytoplamic stress grenules: Dynamic modulators of cell signaling and disease. Biochimica et Biophysica Acta 1863, pp.884-895.
· Odell·Cook. 2013. Immunofluorescence Techniques. Journal of Investigative Dermatology 133, pp.1-4.
· Omer et al. 2020. G3BP1 controls the senescence-associated secretome and its impact on cancer progression. Nat Commun 11(4979), pp.1-15.