세포생물학 2단원 정리

소개글

"세포생물학 2단원 정리"에 대한 내용입니다.

목차

없음

본문내용

(10) SDS-PAGE
SDS로 만든 gel판에 분리하고자 하는 단백질이나 DNA에 β-mercaptoethanol을 첨가하여 (+) charge를 걸어주면 각기 분리되는 원리를 이용한다. SDS는 주변 단백질과의 결합력이 강한데, SDS자체가 (-)charge를 띠고 있어서, 주변 모든 단백질에 (-)charge를 제공한다. β-mercaptoethanol은 단백질의 disulfate bond를 깨뜨리며, -S-S- 결합을 -SH HS- 로 잘라서 단백질들을 polypeptide subunit으로 변환시킨다. 그 후 polyacrylamide로 만든 gel의 (-)극에 놓고 전류를 보내주면, SDS에 의해 (-) charge를 띠는 protein들은 (+)극으로 이동하게 된다. 이 때 분자량이 작은 물질은 빨리 이동해서 멀리서 분리되고, 큰 물질은 천천히 이동해서 얼마 가지 못한 곳에서 분리된다.

(11) Western blotting
항원-항체반응을 이용하여 원하는 protein을 분리하는 방법이다. SDS-PAGE의 gel에 (-)charge를 걸고 (+)charge가 걸린 membrane을 겹쳐 놓고 전류를 흘려보내면 polypeptide가 모두 membrane으로 옮겨가게 된다. 그 후 찾고자하는 polypeptide의 primary antibody를 polypeptide에 결합시키고, 그 위에 형광물질이 결합된 secondary antibody를 결합시켜 형광이 관찰되는 부분을 검출한다.

참고 자료

없음