생화학 실험 보고서 리보플라빈 흡광도 측정 Colorimetry 분광광도계

소개

"생화학 실험 보고서 리보플라빈 흡광도 측정 Colorimetry 분광광도계"에 대한 내용입니다.

목차

Ⅰ. 실험목적

Ⅱ. 실험원리

Ⅲ. 실험도구

Ⅳ. 실험방법

Ⅴ. 결과
1. Absorption Spectrun of Riboflavin
2. Riboflavin의 Standard Curve 작성과 미지샘플의 농도 측정표

Ⅵ. 토의

본문내용

실험목적
∙ 분광광도계를 사용하여 리보플라빈의 흡광도를 측정하여 리보플라빈의 최대 흡수 파장을 알 수 있다.
∙ 분광법, Lambert 법칙, Beer 법칙, Lambert-Beer 법칙을 이해한다. Lambert-Beer 법칙의 개념을 사용해 최대 흡수 파장 E값을 구한다.
∙ 정량실험에 대해 이해하고, 미지농도의 리보플라빈 용액의 흡광도를 조사해 리보플라빈 정량분석을 해본다.
∙ 몰흠광계수가 농도에 무관한 상수임을 증명할 수 있다.

실험원리
∙ 분광법: 자외선 또는 가시광선이 분자에 흡수된다.
1) 분광광도법: 분자에 의해서 흡수된 빛의 양을 측정
2) 형광분석법: 흡수된 광에너지의 운명을 관찰

∙ Lambert 법칙: 투과도와 거리 사이의 관계, 매질에 의해 흡수된 입사광의 비율은 입사광의 강도와는 무관하고, 또 매질의 각 연속적 단위층은 그것을 통과하는 빛의 동등한 부분을 흡수한다.

<중 략>

실험방법
∙ colorimetry 1. Absorption Spectrun of Riboflavin
① 5.32 x M Riboflavin 용액 약 40ml를 준비한다.
② 증류수만 채운 큐벳을 분광광도계에 넣어 400nm에서 흡광도 0으로 맞춘다.
③ 리보플라빈을 큐벳에 넣고 400nm에서 리보플라빈의 흡광도를 측정한다.
⓸ ②, ③ 과정을 10nm 간격으로 420~480nm 범위에서 측정한다.
⓹ 수치를 기록하고 450nm에서 가장 최대 값을 가지는지 확인한다.
⓺ 그래프 용지에 Riboflavin Absorption Spectrun을 그린다. (x축 파장, y축 흡광도)
⓻ 450nm의 흡광도 값을 사용해 Lambert-Beer 법칙(A=Ecl)으로 리보플라빈의 몰흡광계수를 구한다.

∙ colorimetry 2. Riboflavin의 Standard Curve
① Riboflavin 용액과 증류수를 사용하여 총 6 가지의 용액을 조제한다.

참고자료

· 생화학 실험교재