4. 실험 목적:
원하는 물질을 순수한 상태로 얻기 위한 수단으로서 화학에서 주로 사용되는 분리방법중 하나는 크로마토그래피이다. 우리 실험에서는 정상, 역상크로마토그래피법으로 색소를 분리함으로서 크로마토그래피의 원리와 극성의 개념을 배운다.
5. 실험 원리:
1)분리: 혼합물을 각각의 성분으로 나누는 것은 분석의 필수적인 중간 과정이다. 분리의 방법 에는 침전, 여과, 확산, 원심분리, 증류, 용매 추출, 전기영동, 크로마토그래피 등 다양한 방법 이 있다. 그중 크로마토그래피는 화학에서 주로 사용되는 분리방법이다.
2)분배
분배 크로마토그래피에서 분배계수에 따라 물질을 구분한다. 평형 상태에 있는 두 개의 섞이 지 않는 상에서 기질 농도의 비율. 분포율에 따르면 섞이지 않은 두 종류의 액체에 용질이 녹 으면 두 용질의 농도 비율은 일정한 온도에서는 일정하다. 이때의 상수를 분배계수라고 한다.
K=Cs/Cm
Cs: 고정상에 분배된 시료의 농도
Cm: 이동상에 분배된 시료의 농도
Cs>Cm: 성분이 고정상과 친화력이 있어서 천천히 용리됨을 의미
Cs<Cm: 성분이 고정상과 친화력이 없어서 빨리 용리됨을 의미
3)크로마토그래피의 종류와 특징
➀흡착 크로마토그래피
: 화합물이 고체 표면에 흡착되는 정도의 차이를 이용
➁겔 투과 크로마토그래피
: 크기배제 크로마토그래피(SEC) 또는 겔여과크로마토그래피(GFC)라고 알려진 겔투과크로마토그래피(GPC)는 용해된 분자를 미세다공성 충전제가 담긴 컬럼을 통과시키면서 분자의 크기 별로 분리하는 크로마토그래피 기술이다. 시료가 컬럼으로부터 분리된 후 하나의 농도 검출기 를 이용하여 특성을 분석할 수 있다. 충전제의 미세구멍의 크기를 조절하면서 물질을 분리가 능하고 분자량이 작은 물질일수록 구슬안의 구멍 안으로 잘 들어가므로 용출시간이 길어진다.
➂이온교환 크로마토그래피
; 주어진 pH에서 화합물이 해리해서 생긴 이온의 전하 차이를 이용한다.
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