소개글
"서강대학교 현대생물학실험3_식물기반 의약품 생산"에 대한 내용입니다.
목차
1. Abstract
2. Introduction
3. Materials and Methods
4. Results
5. Discussion
6. References
본문내용
Abstract
이번 실험에서는 담배 식물에 Polio virus의 VP gene을 Agroinfiltration하여 Transformation시켜 발현하고, Nucleic acid가 없는 해당바이러스의 VLP를 제작하여, 식물기반 백신을 생성하고, 그 원리를 이해한다. Agrobacterium tumefaciens는 α-Probacterium으로, 식물의 조직에 살며, 숙주에 종양(Tumor)를 생성하는 세균이다. 이를 이용해 식물체의 상처부분에 Tumor를 생성하고, Acetosyringone을 사용해 활성화 상태로 Ti plasmid의 T-DNA를 변형시키는 방법을 이용한 Agroinfiltration을 진행한다. 이를 통해 얻은 단백질(백신)을 Western blot으로 SDS-PAGE를 진행해 원하는 단백질이 생겼는지 알아본다. Infiltration한 식물에서 SDS-PAGE를 진행한 뒤 Instant blue로 염색하여 관찰한 결과, 165kDa, 50kDa, 30kDa, 10kDa band가 진하게 나타났고, Infiltration한 후의 날짜 별 Western blot과 Ponceau S Staining결과 5일차에서 가장 진한 Band, O.D에 따른 Staining결과, A의 O.D 0.8, B의 O.D 0.4로 설정한 결과에서 가장 굵은 Band가 관찰되었다. 위의 결과를 바탕으로 각 Staining의 원리와 장단점을 생각해보았고, Western blot의 보다 나은 VLP를 얻는 방법을 생각해보고, 생각해보았다. 또한 Positive, negative control사용 이유와 그 작용을 알아보고, NC membrane의 단점을 고려해 보다 나은 실험결과를 얻기 위한 방법을 탐구하였다.
Introduction
Agrobacterium tumefaciens는 그람 음성 토양세균으로, 막대 모양이며, 식물내에 들어갈 시 Crown gall tumor(Crown gall disease)를 형성한다. 식물에 대해서 Ubiquitous한 병원체이다.
참고 자료
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