서강대학교 현대생물학실험3_식물기반 의약품 생산

소개

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목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials and Methods
4. Results
5. Discussion
6. References

본문내용

Abstract
이번 실험에서는 담배 식물에 Polio virus의 VP gene을 Agroinfiltration하여 Transformation시켜 발현하고, Nucleic acid가 없는 해당바이러스의 VLP를 제작하여, 식물기반 백신을 생성하고, 그 원리를 이해한다. Agrobacterium tumefaciens는 α-Probacterium으로, 식물의 조직에 살며, 숙주에 종양(Tumor)를 생성하는 세균이다. 이를 이용해 식물체의 상처부분에 Tumor를 생성하고, Acetosyringone을 사용해 활성화 상태로 Ti plasmid의 T-DNA를 변형시키는 방법을 이용한 Agroinfiltration을 진행한다. 이를 통해 얻은 단백질(백신)을 Western blot으로 SDS-PAGE를 진행해 원하는 단백질이 생겼는지 알아본다. Infiltration한 식물에서 SDS-PAGE를 진행한 뒤 Instant blue로 염색하여 관찰한 결과, 165kDa, 50kDa, 30kDa, 10kDa band가 진하게 나타났고, Infiltration한 후의 날짜 별 Western blot과 Ponceau S Staining결과 5일차에서 가장 진한 Band, O.D에 따른 Staining결과, A의 O.D 0.8, B의 O.D 0.4로 설정한 결과에서 가장 굵은 Band가 관찰되었다. 위의 결과를 바탕으로 각 Staining의 원리와 장단점을 생각해보았고, Western blot의 보다 나은 VLP를 얻는 방법을 생각해보고, 생각해보았다. 또한 Positive, negative control사용 이유와 그 작용을 알아보고, NC membrane의 단점을 고려해 보다 나은 실험결과를 얻기 위한 방법을 탐구하였다.

Introduction
Agrobacterium tumefaciens는 그람 음성 토양세균으로, 막대 모양이며, 식물내에 들어갈 시 Crown gall tumor(Crown gall disease)를 형성한다. 식물에 대해서 Ubiquitous한 병원체이다.

참고자료

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