4. 그람염색과 미생물 관찰 결과

소개

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목차

1. Subject

2. Object

3. Introduction
1) 박테리아의 분류 – 염색
2) 그람염색
3) 펩티도글리칸
4) 균

4. Materials & Methods

5. Results

6. Discussion
1) 결과 예상
2) 결과 분석
3) 실험과정 분석

본문내용

1. Subject : 그람염색과 미생물 관찰
2. Object : 그람염색에 대해 알아보고 박테리아를 분류한다.
3. Introduction :
1) 박테리아의 분류 – 염색
▶ stains 염색약: 박테리아의 원형질과 화학적 결합함
- Basic dyes: 색을 띠는 양이온 + 색이 없는 음이온
ex. 메틸렌블루
- Acidic dyes: 색을 띠는 음이온 + 색이 없는 양이온
ex. 에오신
▶ 대부분 박테리아는 음이온을 띠므로, Basic dyes를 사용하는 것이 좋다.
(rich in nucleic acids bearing negative charges as phosphate groups)

▶ 단순 염색: 세균을 슬라이드에 도말하여 고정한 후, 한 가지 염색약으로 염색. (메틸렌 블루, 크리스탈 바이올렛)
▶ 분별 염색: 세균의 식별을 위해 둘 이상의 생물학적 염료를 사용하여 염색. (그람염색, spore 염색)

2) 그람염색
▶ 원리
: 모든 미생물은 그람 양성균과 음성균으로 나뉜다.
: 그람 염색은 세포벽의 펩티도글리칸 함유량에 따라서 사프라닌의 투과성이 다른 것에서 착안되었다.

<중 략>

4. Materials & Methods
- Materials: 박테리아, 피펫, 슬라이드 글라스, 커버 글라스, 알코올램프, 크리스탈 바이올랫, 아이오딘, 95% 에탄올, 사프라닌, 현미경

- Method: 본 실험
① 팁 끝에 세균 배양을 묻힌 후, 슬라이드 글라스에 얇게 펴 바른다.
② 슬라이드 글라스를 알코올램프에 flaming하여 고정한다.(열 고정) (알코올램프에 직접 닿지 않게 주의)
③ 크리스탈 바이올렛으로 1차 염색(1분)
이때, 박테리아 세포가 자줏빛으로 염색된다.
④ back washing; 물로 세척 후 건조 (너무 오래 하지 말 것)
⑤ 매염제(아이오딘)처리 (1분)
1차 염료의 박테리아 세포에의 친화성을 높임

참고자료

· 이현주 외 6인, (2021), 아욱 잎에서 분리한 Bacillus velezensis MV2의 유전체 염기서열
· 분석과 항균활성능 연구, 한국미생물생명공학회지, 49(1), 111-119p
· 위키백과, “Bacillus”, https://en.wikipedia.org/wiki/Bacillus
· 위키백과, “황색포도상구균”, https://ko.wikipedia.org/wiki/황색포도상구균
· 위키백과, “Escherichia_coli”, https://en.wikipedia.org/wiki/Escherichia_coli
· 위키백과, “Fixation”, https://en.wikipedia.org/wiki/Fixation_(histology)
· 위키백과, “대장균”,https://ko.wikipedia.org/wiki/대장균
· Samuel, Linoj P. 외 3인, (2016), Multicenter Assessment of Gram Stain Error Rates, Journal of clinical microbiology, v.54 no.6, 1442-1447p
· 김충환 외 7인, (2013), 매염과 배양 및 탈색시간이 그람 염색상에 미치는 영향, 임상미생물검사학회 초록집, 2013권 1호, 41p