FACS를 이용한 cell apoptosis 및 cell cycle 분석

소개

"FACS를 이용한 cell apoptosis 및 cell cycle 분석"에 대한 내용입니다.

목차

1. 서론
1.1. Abstract
1.2. Introduction

2. 본론
2.1. 재료 및 방법 (Materials & Methods)

3. 결과 및 고찰
3.1. 결과(Result)
3.2. 고찰(Discussion)

4. 참고문헌 (Reference)

본문내용

1.1. Abstract

1965년 John Kerr의 necrosis 연구로 세포사멸에 관한 연구가 시작되었고 1972년 Kerr 에 의해 apoptosis기전이 밝혀졌으며 이를 기점으로 세포사멸에 관한 많은 연구가 진행되고 있다.
최근에는 Etoposide가 DNA손상을 유발하여 apoptosis까지 유도한다는 연구결과가 밝혀졌고 Cell population 단위에서의 뚜렷한 변화를 확인하기위해 이번 연구를 진행하였다. 본 보고서는 apoptosis 분야에 있어 인용도가 급격히 상승하는 연구에 대한 기초 지식과 함께 미래 연구기술로 자리잡기 위한 기법으로 ‘FACS’기법을 도입하였다. 우리는 이 실험법에 대한 설명도 제공할 것이다. 또한 Etoposide로 인해 활성화되는 p53경로에 의한 cell cycle arrest도 FACS기법을 이용해 파악할 것이다.

1.2. Introduction

1) Cell apoptosis
· Apoptosis는 다세포 생물에서 일어나는 세포사멸의 한 형태이다. 생화학적으로 발생한 사건에 의해 발생하며 apoptosis 과정에는 세포 수축, 염색질 응축, DNA 조각화, mRNA의 붕괴가 포함된다.
· Apoptosis의 원인은 유발인자의 위치에 따라 세포 안, 밖 두가지 경우로 나뉜다. 전자의 경우 중 하나는 미토콘드리아의 Cytc에 의한 것으로 이는 대개 바이러스에 의해 유발된다. 헬리코박터균의 독소 vacA는 미토콘드리아 막의 투과성을 높이고 이는 cytc의 세포질로의 유출을 야기한다. 그러면 세포질의 DNA 분해효소가 활성화되고 apoptosis가 시작된다.
· Cell apoptosis는 한번 시작되면 비가역적으로 진행되기에 엄격하게 규제된다. 대표적으로 두가지 메커니즘 중 하나를 통해 시작된다.
Intrinsic pathway의 경우 세포가 cell stress를 받았을 때의 신호와 미토콘드리아의 막 간 공간부터 방출되는 단백질에 의해 활성화된다. Intrinsic pathway는 mitochondrial pathway로도 알려져 있는데 이는 미토콘드리아가 다세포 생명체에 필수적이라는 것을 증명한다. 미토콘드리아의 부재 시 세포호흡이 중단되고 이는 일부 cell apoptosis의 시작을 의미한다.

참고자료

· https://en.wikipedia.org/wiki/Apoptosis
· https://en.wikipedia.org/wiki/Cell_cycle
· https://en.wikipedia.org/wiki/Cell_synchronization
· https://en.wikipedia.org/wiki/P53
· https://en.wikipedia.org/wiki/Flow_cytometry
· https://en.wikipedia.org/wiki/FACS
· https://en.wikipedia.org/wiki/Topoisomerase
· https://en.wikipedia.org/wiki/Etoposide
· Chen G, Deng X. Cell Synchronization by Double Thymidine Block. Bio Protoc. 2018 Sep.
· 최현덕, 백종진, 김상헌, 유선녕, 천성학, 김영욱, 남효원, 김광연, 안순철. (2016). Rosuvastatin이 유도하는 ROS가 전립선암 PC-3 세포주의 세포사멸 유도에 미치는 영향. 생명과학회지, 26(4), 398-405.
· 표석능, 손은수.(2005).세포사멸 관련인자 발굴과 분자기작에 관한 이해.한국과학기술정보연구원,1-13,25-33.
· Sverchinsky, D.V.; Nikotina, A.D.; Komarova, E.Y.; Mikhaylova, E.R.; Aksenov, N.D.; Lazarev, V.F.; Mitkevich, V.A.; Suezov, R.; Druzhilovskiy, D.S.; Poroikov, V.V.; Margulis, B.A.; Guzhova, I.V. Etoposide-Induced Apoptosis in Cancer Cells Can Be Reinforced by an Uncoupled Link between Hsp70 and Caspase-3. Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 2519.
· https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4527242/