1) 플라스미드 DNA 추출 & 전기영동
실험준비물 : E.coli, plasmid DNA extraction kit, 1.5ml tube, pipette, 6x loading buffer, Cut DNA, TAE buffer, agarose gel, 전기 영동 장치, 원심분리기 등
① 배양한 E.coli 세균을 원심분리하여 침전시킨다.
② pellet에 buffer 1 250ul를 넣어 피펫을 이용해 잘 풀어준다. 매우 작은 소량이기에 흔들어도 잘 안 섞여 피펫을 이용해 풀어주어야 한다.
③ buffer 2 250ul를 넣고 부드럽게 섞어준다. 이때도 피펫을 이용해 섞어준다.
④ buffer 3 350ul를 넣고 부드럽게 섞어준다. 위의 방법과 동일하게 섞어준다.
⑤ 4 ℃, 13,000 RPM에서 5~10분 간 원심분리 한다.
⑥ 맑은 상층액을 DNA binding column tube로 옮긴다. 이때 밑에 내용물이 섞이지 않도록 주의해야 한다.
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