1. 실험 목적
[TLC] eluent의 조성을 변화시키면서 얇은 층 크로마토그래피로 각 시료의 Rf를 이용해 극성을 비교하고 미지 시료에 포함된 물질을 결정한다.
[wet column chromatography] 실험1의 결과를 바탕으로 선택한 eluent를 이용해 컬럼 크로마토그래피를 진행해 미지 시료에 섞인 물질(coumarin)을 분리한다.
2. 실험 원리
-용어정리
1) 크로마토그래피 : 소량으로 화합물을 확인하고, 많은 종류로 이루어진 혼합물을 분리하는 방법으로 상 분배 원칙에 근거하여 정지상과 이동상 사이의 물질의 분배를 수반
1-1) 크로마토그래피 관련 용어
- 정지상 : 모세관이나 컬럼 등에 채워져 움직이지 않으며 용질과 상호작용
- 이동상 : 정지상을 통과하면서 이동, 액체, 기체, 초임계 유체 사용 가능
- 용리액 : 크로마토그래피 분리를 위해서 흘려주는 용매
- 용출액 : 크로마토그래피 분리를 통해서 나온 용액
1-2) 크로마토그래피의 정지상 특성에 따른 분류
- 컬럼 크로마토그래피 : 정지상을 긴 원통 형태의 칼럼에 넣어 사용
- 평면 크로마토그래피 : 평면에 정지상을 부착하여 이동상으로 분리, 얇은 층의 정지상을 사각형 유리판 위에 고착하여 사용하는 TLC 존재
1-3) 크로마토그래피의 분류
- 흡착 크로마토그래피 : 화합물이 고체 표면에 흡착되는 정도 차이를 이용
- 젤 투과 크로마토그래피 : 작은 분자가 겔의 틈새를 침투하는 효과 이용
- 이온교환 크로마토그래피 : 주어진 pH에서 화합물이 해리해서 생긴 이온의 전하 차이를 이용
- 분배 크로마토그래피 : 용매에 녹는 정도가 다름을 이용
2) Rf 값 : 분석 물질이 전개된 정도
Rf = 분석 물질이 전개된 거리(발색된 점의 중앙까지) / 전개 용매가 전개된 거리
-이론
1) TLC(얇은 층 크로마토그래피)
TLC는 유리판 위에 실리카 겔이나, 알루미나 가루를 바인더로 만든 고체액체 흡착 크로마토그래피로 실리카 겔이 정지상, 전개 용매가 이동상이다.
참고자료
· 김홍범, 다시 쓴 유기화학 실험, 자유아카데미, 2019, p. 29-60
· 이덕실, 표준일반화학실험, 천문각, 2020, p. 73-75
· Janice Gorzynski Smith, 스미스의 유기화학, 2018, p. 96-103
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