전기영동 실험 보고서

목차

1. 실험제목

2. 실험목적

3. 실험도구

4. 실험방법

5. 실험이론
5-1. DNA
5-2. 중합효소 연쇄반응(PCR)
5-3. 전기영동
5-4. Agarose gel

6. 결과

7. 고찰

본문내용

5-1. DNA : 뉴클레오티드 단위체로 구성된 중합체인 핵산의 일종으로 유전정보를 전달하거나 저장하는 역할을 한다. 뉴클레오티드 단위체는 인산, 리보오스 당, 염기로 이루어진다. 리보오스 당의 2번 탄소에서 산소원자 하나가 제거된 형태의 핵산이다. DNA는 뉴클레오티드 선형 중합체 사슬 두 가닥이 서로 반대로 뻗어나가면서 이중나선 구조를 형성하는데, 그림 1과 같이 이중나선에서 염기는 안쪽에 인산과 디옥시리보오스는 바깥쪽에 위치한다. 각 가닥의 안쪽의 염기들은 상보적 수소결합을 한다. DNA의 복제는 두 가닥의 사슬이 분리되어 각 사슬이 주형이 되고 상보적인 염기를 가진 뉴클레오티드가 주형 가닥을 따라 합성되어 새로운 DNA 가닥을 만드는 반보전적 복제과정을 통해 이루어진다.

5-2. 중합효소 연쇄반응(PCR): 2개의 primer 사이에 낀 DNA 부분을 복제 및 증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 중합효소 연쇄반응은 30~40 사이클 정도 진행되며 매 사이클마다 양이 두 배씩 증가한다. PCR을 이용하면 미량인 DNA시료에서 특정영역을 수 시간에 20~50만 배로 증폭시킬 수 있다. PCR은 그림 2와 같이 변성, 결합, 신장의 세 단계를 거쳐 진행된다. 변성단계는 94~95˚C에서 이중가닥의 DNA를 단일가닥으로 분해하는 과정이고 결합단계는 50~65˚C의 온도에서 primer를 상보적인 단일가닥에 붙이는 과정이다. 신장 단계는 72˚C에서 결합한 primer에 상보적인 뉴클레오티드가 연쇄적으로 결합하여 DNA를 합성하는 단계이다. 중합효소 연쇄반응을 위해서는 복제하고자 하는 부분을 가지는 주형 DNA와 프라이머, dNTP, 완충용액, Taq 중합효소가 필요하다. 프라이머는 DNA복제가 시작하도록 하는 짧은 뉴클레오티드이고 DNA합성방향에 따라 forward, reverse 두 가지가 필요하다.

참고자료

· DNA/네이버지식백과-미생물학백과/https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5144868&cid=61232&categoryId=61232
· 아가로스 겔/네이버지식백과-두산백과/https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=4353235&cid=40942&categoryId=32308
· 전기영동/네이버지식백과-미생물학백과/https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5894293&cid=61232&categoryId=61232
· 중합 효소 연쇄 반응(PCR)/ZUM학습백과/http://study.zum.com/book/12911
· 공주대학교 대학원/PCR을 이용한 유전자변형농산물의 검정방법에 관한 연구/2004/정순일/p. 17