Bradford법을 이용한 단백질 정량

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소개글

"Bradford법을 이용한 단백질 정량"에 대한 내용입니다.

본문내용

1. 실험 목적
: Coomassie blue시약과 단백질이 반응하여 색이 변화하는 정도를 흡광도 측정하여 단백질을 정량할 수 있다.

2. 실험 이론
단백질 정량 중 bradford법은 흡광도를 측정하는 방법으로, 조단백이 아닌 순단백을 정량하는 방법이다. Bradford 법은 Coomassie blue 시약과 단백질이 반응하면 적색의 시약이 청색으로 변하는데, 이를 595nm에서 흡광하는 원리이다. 흡광도가 높을수록 단백질 농도가 많고, 흡광도가 적을수록 단백질 농도가 적으며 단백질 용액이 등전점보다 낮은 pH로 산성화되면 색소와 결합을 하게되며 결합 효율성은 색소 분자와 단백질의 양전하를 띈 잔기를 연결하는 polypeptide backbone과의 소수성 상호작용에 의해 증대된다.

Bradford법의 장점은 신속하고 재현성이 크며 감도가 Lowry법보다 수배 민감하다. 양이온이나 polyphenol, sucrose 등의 간섭이 없다.

참고 자료

식품분석 강의노트/ 부천대학교 식품영양학과
식품영양실험핸드북 / 한국식품영양과학회 편찬/ 도서출판 효일
단백질과 색소 Coomassie blue G250과의 결합능력/ 박노동 / 전남대학교 농과대학 농화학과

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