[생명공학실험 예비레포트]Gel Extraction

소개글

"[생명공학실험 예비레포트]Gel Extraction"에 대한 내용입니다.

목차

1) 실험 제목
2) 실험 날짜
3) 실험 목적
4) 실험 이론
5) 기구 및 시약
6) 실험 방법
7) 참고 사항

본문내용

3) 실험 목적
- 전기영동한 Gel로부터 원하는 DNA를 추출하기 위해 Gel Purification Kit을 이용하여 DNA를 정제한다.

4) 실험 이론
∎ 겔 추출(Gel Extraction)
- 분자생물학에서 Gel extraction(겔 추출)은 agarose gel electrophoresis(아가로스 겔 전기영동)에서 얻은 DNA조각을 분리하는 기술이다. 전기영동 된 gel에서 원하는 band만 잘라내고, 이렇게 잘린 gel에서 DNA만을 회수한다. 추출된 DNA 중 일부는 다시 gel electrophoresis해서 제대로 회수되었는지 확인하는데 쓰인다.
Agarose gel에 DNA 분자를 집어넣고 전류를 흘려주면 이들 분자들은 전기적인 힘에의해 Gel 안에서 이동하게 된다. 같은 크기를 가진 DNA들은 하나의 집단을 형성하여 움직이게 되는데 Gel을 염색하였을 때 이것이 하나의 띠 모양으로 나타난다.

<중 략>

7) 참고 사항
∎ 실험 시 유의 사항
① UV는 DNA를 파괴하므로 UV의 조사를 최소화한다.
② UV는 인체에 대해서도 유해하므로 자외선 차단 고글의 착용 및 피부를 자외선에 노출되는 것을 최대한으로 차단한다.
③ Gel cutting시에 원하는 band만 정확하게 취하고 필요 없는 Gel 부위는 최소한으로 한다.
④ WB에 적절한 양의 EtOH을 가하지 않으면 DNA 수율이 떨어진다.
⑤ Elution Buffer(EB)에 많은 양의 소금을 가하지 않는다. 그리고 EB는 pH 7.0 ~ 8.5로 유지한다.
⑥ Bioneer사의 AccuPrep Gel Purification Kit는 agarose gel 권고량이 400mg이므로, gel 조각이 400mg을 넘지 않도록 한다.
⑦ 추출이 끝난 DNA는 변성되는 것을 방지하기 위해 냉동보관(-20℃)한다.

참고 자료

없음