예비6 Enzyme activity assay 김

소개

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목차

1. 실험 목적

2. 바탕 이론
1) 효소(Enzyme)
2) 효소의 구조
3) 효소 활성(Enzyme Activity) & 효소 활성도 단위 (Unit of Enzyme Activity)
4) 흡광도와 효소 활동도 단위의 관계
5) Candida antarctica lipase B (CalB)

3. 기구 및 시약
1) 실험 기구
2) 실험 시약

4. 실험 방법

5. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
본 실험은 광분해 반응 물질에서 효소 사용의 유‧무에 따라서 실험군과 대조군을 설정하고, 효소가 들어있는 실험군의 UV 흡과도를 통해 농도를 측정하고, 이를 활용하여 효소의 활성도를 계산하는 실험이다. 본 실험에서 사용하는 반응물 pNPB는 광분해 반응으로 스스로 p-NP로 분해된다. 하지만 해당 반응을 CalB효소 사용으로 인한 반응보다 상대적으로 느리다. 생성물 p-NP는 노란색을 띄고, 파자 405nm 부근에서 최대 흡광 Peak를 가진다. 효소 사용 유‧무에 따른 대조군, 실험군을 UV spectrophotometer을 통해 10분 단위로 흡광도를 측정하여 농도 변화를 계산한다. 해당 농도 변화 값을 활용하여 효소의 활성도를 계산한다. 활동도는 U(유닛)인 1분간 1의 기질 변환을 유도하는 효소 활성의 양을 기준으로 계산한다.

2. 바탕 이론
①효소(Enzyme)
효소는 단백질의 일종으로 화학 반응에서 반응 물질 외에 미량의 촉매 역할로 반응 속도를 증가하는 효과를 가진다. 이로 이핸 미생 물 내 화학 작용은 촉매의 존재로 인해여 속도가 빨라지게 된다. 하지만 효소가 일반적인 화학 촉매와의 다른 부분이 있다.

참고자료

· ‘2020년도 생물 화학 공학 이론 및 실험’ 실험 노트
· 오계헌 외 4명, 최신 미생물학 실험 제 2판, 신광문화사, p210~220
· Willey, Sherwood, Woolverton, 미생물학 제9판, (주)라이프사이언스, p137~172, p358~371
· 유주현 외 1명, 응용미생물학실험, 도서출판효일, p211~250