예비4 Transformation 김

소개

"예비4_Transformation__김"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험 목적

2. 바탕 이론
1) 유전자 재조합 기술
2) 형질변환
3) Selection marker, Selectable marker

3. 기구 및 시약
1) 실험 시약
2) 실험기구

4. 실험 방법

5. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
본 실험은 Transformation(형질변환)을 통해 재조합된 유전자인 DNA(eGFP)를 Competent Cell 안에 삽입한 후 열처리 및 온도 조절을 통한 세포 안정화를 거친 후 LB배지에서 배양한다. 후 에, 각 균에서 형질변환이 잘 일어난 세포들만 분리하기 위해, 항생물질인 Ampicillin이 포함된 고체 배지를 이용하여 배양 후 이를 대조군과 비교하여 이를 통해 형질 전환에 대한 전박적인 특성을 이해하는 실험이다.
일반적으로 DNA 삽이 일어나지 않은 대조군의 경우, 항생 물질에 대한 저항성을 가지고 있지 않지만, Plasmid가 포함된 Competent Cell의 경우, 항생 물질에 대한 저항성을 가지고 있어 결과적으로 배양 후 살아남는다. 이 때 결과적으로 해당 세포는 실험에서 selectable marker가 되는 것으로 볼 수 있고, 해당 배양 결과 형질변환 세포만이 구분되는 변색 결과를 보여준다.

2. 바탕 이론
①유전자 재조합 기술
생명공학 분야 발전에 따라서 서로 다른 생물에서 발현한 유전 요소를 조작하는 재조합 기술의 필요성이 증대하고 있다. 해당 기술은 크게 형질변환(Transformation), 형질도입(Transduction), 접합(Conjugation)이 있다.

참고자료

· ‘2020생물화학공학 이론 및 실험노트’
· Willey, Sherwood 외 1명, 미생물학 제9판, (주)라이프사이언스, p137~172, p358~371
· 유주현 외 1명, 응용미생물학실험, 도서출판효일, p211~250
· 오계헌 외 4명, 최신 미생물학 실험 제 2판, 신광문화사, p210~220