[생명공학 실험A+]실험보고서 - 천연물 큰 잎 모자반 추출물 분리 (HPLC, NMR)

소개

생명공학실험시간에 실험한 내용에 대한 최종제출 실험보고서입니다.
A+학점맞았습니다.

목차

1. 실험목적

2. 실험 관련 이론
1) HPLC (High Performance Liquid Chromatography)
2) HPLC 분리원리
3) HPLC 특징
4) NMR ( nuclear magnetic resonance )
5) NMR 원리
6) 1H-NMR

3. 실험장치 및 방법
1) 실험 장치 및 시약
2) 실험방법

4. 실험결과 및 고찰
1) HPLC 측정결과
2) 항산화능력 측정
3) NMR 측정결과

5. 결론

본문내용

1. 실험목적
천연물 큰 잎 모자반에 어떤 화합물이 들어있는지 알아보기 위해 용액을 농축시킨 후 극성이 다른 용매들을 이용하여 극성별로 분리해 추출한다. TLC를 통해 성분분리를 확인하고 항산화 능력 측정, HPLC 측정, NMR 측정을 한다. 이를 통해 큰 잎 모자반에 어떤 화합물이 있는지 예측한다.

2. 실험 관련 이론
- HPLC (High Performance Liquid Chromatography)
고성능 액체 크로마토그래피
1개 이상의 혼합물(유기화합물)을 물리적으로 각각의 성분으로 분리하는 기술.
- HPLC 분리원리

· 흡착작용(adsorption):고정상에 부착된 기능단에 시료가 흡착되어 각 성분을 분리
· 분배작용(partition):고정상의 기능단이 역상으로 각 시료성분들이 서로간의 분배로 분리
· 이온교환작용(ion exchange):양이온이나 음이온의 시료가 상대이온과의 경쟁으로 교환이 일어나 정지상에 분포
· 분자체 작용 (size exclusion, gel permeation): 겔의 다공성 크기에 시료분자의 크기에 따라 투과성에 의해 분리하는 경우.
즉, 분자가 큰것이 먼저, 작은것이 나중에 용리되는 원리
· 순상(normal phase): 고정상(컬럼)이 이동상(용매)보다 극성이 강한 경우. 극성이 큰 실리카겔을 충진제로 사용하면 실리카 표면에 존재하는 하이드록시그룹과 시료간의 머무름 현상이 나타남.
·역상(reverse phase): 실리카 담체에 탄화수소 C18를 결합시켜 비극성 충진물로 만들고 메탄올과 완충용액을 극성용매로 만들어 이동상으로 이용하여 분리하는 원리. 극성이 큰 수용성 시료분석에 적합. 대부분의 HPLC는 역상

- HPLC 특징
시료의 특성에 따라 정량, 정성 및 분취가 가능하다.
정량 : 크로마토그램 피크 면적을 이용하여 가능
정성 : 크로마토그램의 피크 Retention time 을 통하여 가능

참고자료

· 식품분석법 채수규 외 3 지구문화사
· 기기분석의 원리와 응용 박면용 외 녹문당
· 남계춘 외 3. 유기구조분광학 2판 자유아카데미