Ⅱ. 서론 (Introduction)
1. 플라스미드 (Plasmid) DNA
2. Plasmid DNA 분리
3. Plasmid DNA 정제
Ⅲ. 실험재료 및 방법 (Materials & Methods)
1. 실험재료(Materials)
2. 실험 방법(Methods)
Ⅳ. 실험결과 및 결론 (Data and Results)
Ⅴ. 고찰 (Discssion)
Ⅵ. 참고 문헌 (Reforence)
본문내용
1. 플라스미드 (Plasmid) DNA
플라스미드는 외부염색체 DNA분자를 작은 염색체로 전이 이동시키는 것이다. 정의에 따라 플라스미드는 복제단위(replicon)로써 외부염색체 상태에서 안정적으로 유전되는(특별한 분리 없이 유지되는)물질 이다. 전부는 아니지만 대개의 플라스미드는 세포의 생존에 꼭 필수적인 것은 아니다. 그러나 항생제가 존재하는 여러 경우에서는 생존에 필수적인 존재가 되기도 한다.
Plasmid DNA란 염색체 밖에 존재하는 DNA(extrachromosomal circular DNA)이다. Plasmid DNA는 그 자체 내에 replication origin을 가지고 있어서 박테리아 내에서 염색체 DNA 복제와 상관없이 독자적으로 복제되는 특징이 있다. 박테리아의 항생제에 대한 내성이 한 세포에서 다른 세포로 옮겨질 때 plasmid를 통해 이루어진다고 알려진 후 항생제에 대한 유전자뿐 아니라 항생제 함성이나 독성물질의 합성, 질소고정 및 분해, 여러 효소들에 대한 유전자를 함께 가지고 있음이 밝혀졌다.
Plasmid는 한 세포에서 다른 세포로 옮겨갈 수 있는 성질을 지니고 있으므로 유전자를 옮기는 운반자 혹은 벡터(vector)로 작용한다. 외부에서 연구하고자 하는 DNA 조각을 plasmid에 삽입하여 연결시킨 후 박테리아에 넣어주면 이 형질전환된 세포 내에서 DNA는 독자적으로 복제되므로 DNA 조각을 복제하는 vector로 이용될 수 있다.
분자유전학 실험에 사용되는 plasmid는 자연계에 존재하는 plasmid의 특성 부위를 조합하여 만든 plasmid가 이용된다, 이러한 plasmid는 작고 활성이 높은 relaxed replication origin을 가지고 있으며 적어도 항생제 내성에 대한 한 개의 유전자를 지니고 있다. 또한 이들 plasmid 내에는 한 가지 제한효소에 의해 단지 한 군데만 절단될 수 있는 부위를 여러 개 가지고 있으므로 실험실 내에서의 조작을 쉽게 해주고 있다.
참고자료
· 나노헬릭스, Reliable Partner for DNA Technology, 플라스미드 (Plasmid) DNA 분리, 2013.12.03
· https://m.blog.naver.com/nanohelix/70180385720
· 뾰로롱 요술봉이 필요해♥, DNA의 분리, 2012.02.29
· https://blog.naver.com/yiminari/20152217924
· 작전명 공부하는 대학생들, 의데공대생, Plasmid DNA Mini Prep, 2013.10.31
· 약품생화학실험, 약품생화학분과회 저, 신일북스, 2011
· 캠벨 생명과학 포커스 2판, Lisa A. Urry 외 4명, ㈜바이오사이언스출판, 2019
· 해피캠퍼스, E-coli plasmid DNA 분리 실험보고서, 2006.12.03
· Grebom, Alkaine lysis 방법에 의한 plasmid DNA의 분리, 2009.03.24
· https://blog.naver.com/jsmphm/150044830641
· Molecular Cloning: A Laboratory Manual by Sambrook and Russell.3rd Ed. 2001
· Principles and Techniques of Practical Biochemistry by Wilson and Walker.5th Ed. 2000
· Seize the day!, Plasmid DNA의 분리 및 정제방법
· https://arwen.tistory.com/entry/52-Plasmid-DNA%EC%9D%98-%EB%B6%84%EB%A6%AC-%EB%B0%8F-%EC%A0%95%EC%A0%9C%EB%B0%A9%EB%B2%95
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