[세포생물학실험]SDS-Page

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목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론 및 원리
3. 실험 방법
4. 실험 결과

본문내용

1. 실험 목적

가. SDS-PAGE는 DNA를 전기영동으로 분리하여 크기를 알아보듯이 단백질도 SDS를 이용하여 전하는 모두 잃게 하고 크기에 의해 분리되게 만들어 전기영동을 통해 단백질의 크기를 알아본다.

2. 실험 이론 및 원리

가. 실험 배경
Sodium dodecyl sulfate-polyacryamide gel electrophoresis (SDS-PAGE)는 단백질을 정제하는 동안 이를 monitor하고, 정제된 단백질의 동질성(homogeneity)을 알기 위한 가장 좋은 방법이다. SDS-PAGE는 일반적으로 단위체의 분자량을 결정하고, 정제된 단백질의 단위체 구성을 알기 위해 사용된다. SDS-PAGE는 더 깊은 연구를 위한 충분한 단백질을 얻기 위해 scale up될 수 있다. 또한, SDS-PAGE와 Isoelectric focusing을 결합시킨 2차원 분석법은 해상도(resolution)가 아주 좋은 방법으로서 하나의 gel에서 수천 개의 polypeptide를 분리할 수 있다.그리고 Blotting method와 결합해서 사용하면 단백질들의 homology를 분석할 수 있다. 이처럼 SDS-PAGE는 단백질 분석에 이용할 수 있는 강력한 수단을 제공한다.

나. Agarose gel을 이용한 전기영동(이동)의 원리
단백질 분자들은 표면의 여러 부위에 양전하 또는 음전하를 띄고 있어 단백질 혼합액 속에 전극을 설치하고 직류 전압을 가하면 음극 또는 양극으로 이동하게 된다. 이처럼 전기장 안에서 하전된 입자가 양극 또는 음극 쪽으로 이동하는 현상을 전기영동이라 한다. 이동하는 속도는 입자의 전하량, 크기와 모양, 용액의 pH와 점성도, 용액에 있는 다른 전해질의 농도와 이온의 세기, 지지체의 종류 등 여러가지 요인에 따라 결정된다. 이러한 성질에 의해 전기영동법은 아미노산, 뉴클레오티드, 단백질 들과 같은 하전된 물질들을 분리하거나 분석하는 데 매우 효과적인 수단으로 이용된다.

참고 자료

없음