1.PCR정의
PCR의 full name은 polymerase chain reaction이고, 중합효소연쇄반응이라고 한다.PCR의 정의는 생체 내에서 일어나는 DNA복제과정이 시험관에서 미량의 DNA주형가닥으로부터 원하는 DNA조각을 대량으로 합성해내는 방법이다. PCR의 과정은 크게 3가지로 나눌수 있다. 1.DNA변성 2.프라이머 결합 3.DNA합성 이다. PCR의 필수요소는 Taq polymerase, primer,주형가닥이다. 순서는 시험관에 필수요소들을 넣은 후 3번의 온도조절을 통해 이루어진다. 첫 번째,DNA변성(degeneration)은 주형가닥 DNA를 94도의 높은 온도로 가열하여 단일가닥으로 분리한다. 첫 cycle은 5분동안 이루어진다.두번째,Primer결합(annealing)은 표적 서열 양쪽 말단에 두 종류의 프라이머를 결합시킨다. 50-65정도의 낮은 온도에서 진행된다. 세 번째,DNA합성(polymerization)은 Taq DNA polymerase가 주형가닥에 dNTP를 결합시켜 새로운 DNA합성을 한다. 70-74도 정도 유지한다. 마지막 cycle에는 약 10분정도 시간을 충분히 주는 것이 좋다. 이렇게 합성된 DNA를 보관해줘야하는데 DNA조각이 손상되지 않도록 4도에 보관해줘야 한다.
2.PCR의 종류
이러한 PCR를 응용하여 쓰임에 따라 종류가 나뉜다.1)RT-PCR 2)Real-time PCR 3)Nested PCR 4)Inverse PCR 5)Asymmetric PCR 6)Touchdown PCR 7)RAPD PCR 8)Multiplex PCR 9)Colony PCR 10)Hot start PCR 11)Long Accurate PCR 12)Competitive PCR 13)RACE PCR 14)IS PCR 15)DDRT-PCR 로 나눌수 있다.이 중에서 10가지만 순서대로 설명하겠다.
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