HPLC 레포트

소개

HPLC (High Performance Liquid Chromatography)

목차

1.실험 목적 이해
2.실험 기기 이해
3. 실험결과 분석
4. Discussion
5. Reference

본문내용

1. 실험 목적 이해
크로마토그래피의 원리를 이용하여 HPLC의 이론 및 기기 조작을 통하여 혼합 액상의 성분을 분석하여 시료의 정량, 정성 분석 방법을 익힌다.

2. 실험 기기 이해
(a)-이동상 (Mobile Phase)
이동상이란 기체나 액체의 상을 지닌 것으로서 크로마토그래피를 사용한 혼합물의 분리에서 관에서 빠져나가는 물질을 의미한다. 이 때 이동상이 기체인 경우를 Gas Chromatography(GC), 액체인 경우는 Liquid Chromatography(LC)라고 한다.
이동상의 종류에 따라 GC와 LC는 각각 다른 특성을 지닌다. GC의 경우 이동상이 기체이기 때문에 휘발성을 지닌다. 같은 이유로 GC는 분자의 안정성이 열에 영향을 받으므로 냉각과정을 거쳐야한다. LC는 이동상이 액체이기 때문에 시료의 용해성(solubility)를 고려해야한다.
일반적으로 이동상은 고정상의 종류와도 관계가 있다. 유기용매는 극성칼럼을 사용할 때 쓰이고 완충용액이 포함된 용액은 비극성 칼럼을 사용할 때 쓰인다. 이동상은 사용하기 전 filtering이나 기포 제거 과정을 거치게 된다.

(b)-칼럼 (Column)
고정상 용기를 충전한 분리관은 높은 압력을 견딜 수 있어야 한다. 이 때 크로마토그래피 실험을 하는 과정에서 column에 기포나 Channel(통로)가 생기지 않도록 고정상을 충전해야한다. 크게 column의 종류를 두 가지로 나눌 수 있다. 제조용 column은 시료의 양이 g, pound 단위로서 분리 정제의 과정에 많이 사용된다. 반면 분석용 column은 mg 단위의 시료를 분석하는 데 사용된다.
비극성 칼럼을 사용하는 경우를 예로 살펴보자. 극성이 적은 이동상일수록 늦게 용출되는데 이는 고정상과의 친화력 때문이다.

(c)-펌프 (Pump)
펌프는 column으로 이동상을 일정 속도로 보내주는 장치로서 펌프의 성능은 이동상의 용출속도에 영향을 끼친다.

참고자료

· 이준우 "최신분석화학", 신광문화사. (1999)
· 이송주, 김준태, 채희남 "분석화학", 자유아카데미 (1999)
· 정용순, 강삼우, 이용일, 이용문 “기기분석”, 반도출판사(1997)
· Douglas A. Skoog, Donald M. West, F. James Holler “Fundamentals of analytical chemistry”, 6th edition, .Saunders college, (1992)
· Douglas A. Skoog, F. James Holler, Timothy A. Nieman, "Principles Of Instrumental Analysis", 5th edition, (1998)
· Christian, Gary D. (2004). Analytical Chemistry 6th Ed: 728. New York, USA: John Wiley & Sons. (Van Deemter equation)