●식영과수석 현 막학기 휴학생●
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목차
1. 실험목적 및 원리
2. 시약 및 준비물
3. 실험 방법
4. 실험 결과
5. 고찰
본문내용
1. 실험목적 및 원리
이 실험의 목적은 간 균질액 안에 단백질이 얼마나 들어있는지를 알아보기 위한 실험이다.
※ 단백질 정량법
① UV 분석법
방향족 아미노산인 Phe(페닐알라닌), Tyr(티로신), Trp(트립토판) 잔기들은 각각 275nm와 280nm의 자외선을 흡수한다. 많은 단백질들에 있어서의 이 아미노산들의 합친 수준은 거의 일정하므로 단백질의 농도는 280nm에서의 흡광도와 비례하게 되는데, 이것을 이용하여 단백질을 정량하는 방법이다. 그리고 비교적 감도가 좋은 편이다(적은 양의 단백질도 추출가능).
장점
- 측정범위가 50μg~1mg/ml 정도로, 간단하게 sample의 회수가 가능하다.
- 정량하는 데 시간이 적게 든다.
- 순수한 단백질의 농도는 280nm에서의 흡광도를 측정함으로써 신속히 결정할 수 있다.
단점
- tryptophan, tyrosine, phenylalanine 잔기에 의한 방법이므로 유사 파장의 공존물질, 미지 시료의 경우는 주의해야 한다.
- 자연물들에는 280nm에서 흡광을 나타내는 화합물들이 많이 있기 때문에 흡광에 대한 보정을 해주어야 하는 경우가 핵산과 같은 예에서 생길 수 있다.
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