PCR & Gel electrophoresis 예비보고서
- 최초 등록일
- 2019.12.21
- 최종 저작일
- 2019.06
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소개글
"PCR & Gel electrophoresis 예비보고서"에 대한 내용입니다.
목차
1. 실험제목
2. 실험날짜
3. 실험내용
4. 참고문헌
본문내용
PCR은 polymerase chain reaction으로, 알고 있는 일부의 소량의 특정 DNA 부위를 반복 합성하여 증폭시키는 방법이다. PCR의 한 cycle은 총 세가지 단계로 나뉘는데, 첫번째는 Denaturation이다. 복제 대상 유전자(GOI, gene of interest)가 포함되어 있는 이중 가닥 DNA를 90-95℃에서 가열하여 수소 결합을 끊고, 단일 가닥으로 unzipping 하는 과정이며 Taq DNA 중합 효소를 이용한다. 두번째는 Priming이다. GOI의 3'에 상보적인 20-30 bp 정도의 DNA primer가 template DNA에 붙을 수 있게 온도를 50-65℃로 낮춘다. 마지막으로 extension이다. DNA 중합 효소가 작용하여 primer의 뒤를 이어서 5'에서 3' 방향으로 template DNA에 상보적인 복제 가닥이 합성된다. 온도는 DNA 중합 효소가 최적의 활성을 보이는 구간으로 설정하는데, Taq polymerase의 경우에는 75℃~80℃라고 한다.
참고 자료
David Freifelder, 분자생물학, 아카데미서적, 1989, pp130-137.
T.A.Brown, Gene Cloning: second edition, Chapmand and hall, 1990, pp66-74.
Kathleen Park Talaro, Barry Chess, Foundations in Microbiology: Basic Principles 10th Edition, McGraw-Hill Education, 2017, pp305-318.
