ELISA(엘라이자) 실험 레포트

목차

1. ELISA 1
1) Purpose
2) Introduction
3) Equipment
4) Material
5) Method

2. ELISA 2
1) Equipment
2) Material
3) Method
4) 전체 ELISA Result

본문내용

1. Purpose
1) ELISA를 정확히 실시할 수 있어야 한다.
2) ELISA의 원리를 설명할 수 있어야 한다.
3) ELISA를 실험 및 진단 목적으로 응용할 수 있어야 한다.

2. Introduction
① ELISA란?
효소면역정량법은 오늘날 가장 널리 이용되는 면역정량법으로 항원 항체 반응을 이용하여 Ag 혹은 Ab를 정성, 정량할 수 있는 방법이다. 항체에 효소를 결합시켜 항원-항체 반응을 확인하는 방법으로 방법도 간단하고 다량 분석이 가능하다. 여러가지 방법이 있지만 1) coating/capture, 2) Plate blocking, 3) probing/detection, 4) signal measurement 이렇게 4가지 동일한 기본 요소를 가지고 있다.

② 원리
항원의 농도는 기질 전환 정도에 따라 결정되고 이름에서 알 수 있듯이 항체나 항원이 고체상에 흡착(immunosorbent)되어 있는 원리가 포함되어있다. 고체상의 흡착은 결합하지 않은 자유 항원을 세척을 통해 제거할 수 있게 해주고 mouse나 rabbit 등을 면역접종한 후 얻은 serum이나 fusion을 통해 얻은 hybridoma의 culture supernatant 안에 원하는 antibody가 생성되어 있는지를 확인하기 위함이다. 다양한 면역정량법이 있고 특히 샌드위치와 경쟁적 ELISA 방법이 빈번히 이용되는데, 샌드위치 ELISA는 높은 민감도를 갖는다. Direct ELISA법은 항체가 아닌 항원이 고체상에 고정된다는 특징이 있다.

③ 종류
1. Direct ELISA
Direct ELISA는 항원과 반응하는 항체에 바로 효소를 결합시켜 사용하는 방법을 말한다.
a) 항원의 양을 측정,
b) 항체에 대한 표지 항체가 요구됨,
c) 항원이 요구됨

2. Indirect ELISA
항원과 결합하는 (1차항체, primary antibody)에는 효소가 없고, 그 항체와 결합하는 항체(2차항체, secondary antibody)에 효소가 결합되어 있는 분석방법. 일반적으로 isotype에 대한 항체에 효소가 결합된 형태이며 자신이 이용하는 일차항체의 급(isotype)에 맞는 효소결합항체를 이용한다.

참고 자료

없음