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대장균 MPN법 실험보고서

환경학과
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최초 등록일
2017.10.29
최종 저작일
2016.04
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목차

1. 제목
2. 재료
3. 검체의 채취 및 조제
4.실험방법
5. 실험사진
4. 실험결과

본문내용

< 일반 미생물 실험 >
(1) 제목 : 대장균 실험 MPN법 : Most Probable Number method (단위 : MPN/100ml)

2. 재료 : 광학현미경, Petri Dish, 백금이(면봉), 삼각플라스크, 슬라이드글라스, 스포이드, 유리봉, 히트 플레이트, 마그네틱, 싱크대 미생물 시료, EMB, Lactoesse broth, 가스관, 시험관, 한천배지, BGLB, 유당배지, 흡습지
전 실험에서 배양한 미생물 colony(집락)=Petri Dish, 백금이(면봉), 알코올 램프, 슬라이드 글라스, 증류수(병), 현미경, 시약 : Crystal Violet, G-요오드 용액, Acetone=alcohol, Safranin, 방열장갑

3. 검체의 채취 및 조제
① 무균적으로 채취한다.
② 멸균된 용기에 넣어 1시간 이내로 실험실로 운반 후 실험
③ 1시간 이상의 시간이 걸릴시 10도 이하에서 저온
④ 잔류염소가 있을시 10% 티오황산나트륨 용액으로 잔류염소를 제거한다.
╶ 120ml의 시료당 10% 티오황산나트륨 용약 0.1ml는 잔류염소 15mg/l를 제거할 수 있다.
⑤ 시료를 유당이 포함된 배지에 배양시 대장균 군이 증식하면서 가스를 생성하는데 이때의 성 시험관수를 확률적인 수치인 최적확수로 표시하고 단위는 위와 같다.

4.실험방법
╶ 대장균군의 정성시험은 일반적으로 추정, 확정, 완전 실험의 3단계로 진행된다.

(1) 추정실험
╶ 유당배지를 넣은 발효관에 검체를 식종하여 ±35 도의 온도에서 24시간 배양하여 가스발생 유무를 확인한 뒤
대장균 군의 유무만을 판정하는 실험이다.
만약, 24시간에서 가스발생이 안되면 48시간 후에 재확인하고 그때에도 가스발생이 없으면 음성, 있으면 양성으로
한다. (MPN-계산가능)

※ 추정시험 방법
╶ Lactoesse broth 13g을 증류수 1L에 혼합 후 100℃에서 끓인다. (끓을 때 까지 마그네틱바 로 교반한다.)
╶ 거즈로 플라스크 입구를 막아 끓인다.
<준비물> : 시험관 25개 이상, 가스관 25개 기타 실험도구

참고 자료

없음
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