개요 및 column chromatography의 준비로서의 buffer 만들기

소개

1M의 Tris-HCl(pH7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl농도의 elution buffer를 만드는 실험을 한후 제출했던 만점 레포트 입니다.

목차

1. 주제

2. 목표

3. 서론
1. Buffer란 무엇인가,
2. Mol농도의 개념,
3. pH미터의 사용법,
4. pH미터의 주의사항,
5. AP(Akaline Phosphatase)의 특성,
6. AP 정제과정, DEAE Column Chromatography)

4. 본론
1. 실험도구
2. 실험방법

5. 결론

6. Result

7. Discussion

Reference

본문내용

주제 : 개요 및 column chromatography의 준비로서의 buffer 만들기
목표 : 1M의 Tris-HCl(pH7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl농도의 elution buffer를 만든다.

서론
Buffer란 무엇인가 :
buffer란 산이나 알칼리성 물질에의해 생기는 pH의 급격한 변동을 막아주는 물질이다. 이것은 작은 양의 산이나 염기성을 중화시키면서 어떠한 용액의 pH를 비교적 안정적이게 만들어준다. buffer는 안정적이거나 특정한 pH범위를 유지시켜야하는 과정이나 반응에 중요하게 쓰인다. buffer가 pH변화를 조절시킬 수 있는 이유는 짝산(conjugate acid)과 짝염기(conjugate base)가 평형상태로 존재하고 있기때문이다. 즉, 약한 전해질의 용액에 포함되어있는 이온과 같은 종류의 이온을 외부하게 가하게 되면 그 이온의 농도가 감소하는 방향으로 반응이 이동하게 되어 새로운 평형상태에 도달하게 되어 일정 pH를 유지할 수 있게 된다.

<중 략>

실험시 알아두면 좋은 것들 -
1. HCl사용할 때
• 비닐장갑 꼭 착용한다
• 파이페팅할 때 옆으로 튀거나 파이펫에 묻지않도록 조심히한다
• HCl에서 나오는 기체를 흡입하지않도록 사용하고 바로 뚜껑을 닫는다
2. Pipet사용할 때
(one stop은 처음 바로 눌러지는 부분, two stop은 한번 누르고 더 꾹 눌러지는 부분)
1) 원하는 부피를 손잡이 부분을 돌려가며 맞춰준다.
2) 피펫에 피펫팁을 꽂는다.
3) 버튼을 누른뒤 약간 더 힘을 주면 one stop을 지나고 two stop까지 누르게 되는데 two stop지점을 누르면 원하는 볼륨보다 더 많이 흡입을하게 된다.
4) 샘플에 피펫팁을 두고 눌렀던 버튼에서 손가락을 아주 천천히 떼어낸다.

참고자료

· http://chemwiki.ucdavis.edu/Physical_Chemistry/Acids_and_Bases/Buffers, 2015.03.12
· http://www.chembuddy.com/?left=concentration&right=molarity, 2015.03.12
· http://home.dhc.ac.kr/~young/lecture/study/1st_test/pH-buffer.htm, 2015.03.12
· http://blog.naver.com/iambest22/220137315563, 2015.03.12
· http://www.kau.se/sites/default/files/Dokument/subpage/2012/10/bioteknik_lab_alkaliskt_fosfatas_pdf_21128.pdf, 2015.03.12
· http://blog.daum.net/tofutofu/6988005, 2015.03.12
· http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1150479&cid=40942&categoryId=32251, 2015.03.12