Western Blot 실험 리포트

소개글

Western Blot 실험을 한 후 제출했던 만점레포트 입니다.

목차

1. Tile
2. Purpose
3. Introduction(Western Blot이란?, beta actin & alpha tubulin이란?)
4. Materials
5. Methods
6. Result
+Western Blot 관련 두가지 문제

본문내용

Western Blot

Purpose : 단백질의 SDS-PAGE 분리, 단백질의 gel으로부터 membrane으로의 transfer를 하고 항체반응 및 항체에 부착된 효소의 반응에 의한 발색반응을 보고 단백질의 크기를 확인하는 것이다.

Introduction :
1)Western Blot이란?
Western Blot이란 생체 용액에 있는 개개의 단백질 성분을 분리하는데 기본적인 기술이다. 여러가지 단백질을 포함하고 있는 세포 또는 조직의 추출물을 전기영동하여 그 속에 들어있는 단백질을 크기별로 구분한 다음 흡착지에 옮겨놓고 조사하고자 하는 단백질의 항체와 결합시켜 그 단백질의 존재 유무와 크기 등을 밝히는 검사이다. 이 것은 어떠한 단백질이 일정한 세포속에 발현되고 있는가를 확인하거나 그 발현되는 단백질의 크기 변화를 관찰하는데 이용된다.

<중 략>

1. SDS-PAGE에서 well에 prestained molecular weight marker와sample을 로딩한다.
2. Assembly를 power supply에 연결하고, 로딩 버퍼의 dye가 젤의 바닥까지 도달할 때까지 110V로 전기영동한다. (1-2시간정도)
3. Prepare 1x transfer buffer concentration 10% methanol and keep in 4˚C.
4. Set the sandwich in transfer buffer
(바닥-투명(+)-sponge-3MM-3MM-membrane-gel-3MM-3MM-sponge-검정(-)-위)

<중 략>

굉장히 많은 단백질의 종류중에는 homodimer과 heterodimer가 있다. 이번에 우리가 실험에서 쓴 a-tubulin은heterodimer이다. 일단 "homo"라는 말은 "같은것"이라는 뜻이고 "hetero"는 다른 것이라는 뜻이다. 그리고 "dimer"라는 뜻은 이중체라는 뜻으로 두개가 붙어 있는 것이라는 의미이다. 그래서 생각해보면 homodimer는 같은것 두개가 붙어서 형성된 이중체를 말하는 것이고 heterodimer는 다른것 두개가 붙어서 형성된 이중체를 말한다.

참고 자료

없음