DNA,RNA,protein 정량

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DNase가 기능을 발휘하는 데 필수적인 Mg2+를 제거하기 위해 EDTA를 함유하고 있는 용액으로 핵을 부수고, 계면활성제인 SDS를 사용해 DNA에 결합해있는 단백질을 해리시켜야 함.

해리 시킨 후 다시 단백질을 proteinase K로 분해한다. proteinase K를 선택한 이유는 같은 단백질 분해효소라도 트립신, 키모트립신 등은 pancreas에서 추출하기 때문에 DNase가 섞여 있으며, 또한 proteinase K는 SDS가 존재해도 활성이 떨어지지 않으며, 금속이온이 활성에 필요하지 않기 때문임.

분해된 단백질은 강한 산화력을 페놀과 혼합하여 변형시킨다. 그 후 페놀을 제거하고 RNase A로 RNA를 분해한다. 이 때 사용하는 RNase A는 미리 고온처리하여 RNase에 섞여 있는 극히 소량의 DNase를 불활성화 시킨 것을 사용한다. 그리고 RNase를 페놀처리로 없애고 투석 또는 에탄올 침전으로 염을 제거하면 고분자 DNA를 얻을 수 있다.

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