SDS전기영동 실험

소개

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에이쁠맞은 보고서에용^^

목차

1. 실험의 배경지식
2. 원리 및 목적
3. 실험시약 및 실험기구
4. 실험방법
5. 데이터
6. 실험결과 및 고찰
참고문헌

본문내용

전기영동은 특히 단백질의 분리, 특성결정, 동정, 정량 등에 잘 이용되는데, 단백질 분자의 하전은 아미노산의 조성과 pH의 함수이다. 낮은 pH에서는 양성자화로 인해 양의 하전을 띄고, 높은 pH에서는 음의 하전을 띠며, 어떤 중간 정도의 pH(등전점)에서는 순하전이 0DL 되어 양성이온으로 전기장에서 이동하지 않는다. 따라서 단백질이 최대한 잘 분획되려면 다음과 같은 조건들이 최적화되어야 한다.
⑴ 완충액의 pH(하전의 차이가 최대로 될 것)
⑵ 겔의 세공의 크지(최대한의 분자사별 작용)

<중 략>

음이온은 음전하를 띠고 있어 양극 쪽으로 이동하며, 양이온은 양전하를 띠고 있어 음극 쪽으로 이동한다. 이온의 혼합물이 적절한 매개체의 중앙에 위치하게 되고 그 매개체에 전위가 적용되면, 이온들은 각각의 전극 쪽으로 이동하기 때문에 분리된다. 분리도는 각 이온에 대한 단위 질량당 전하 등의 여러 요인들에 따라 다르다. 이것은 그 다음에 매개체의 pH와 이온 농도에 의해 영향을 받는다. pH의 감소는 이온들을 양(+)으로 만들며 pH의 증가는 이온들을 보다 음(-)으로 만들고, 이온 농도를 증가시키면 이온들의 전하를 억제한다.

<중 략>

① 시료 5종류 1ml와 5% sample buffer 1ml를 혼합한다.
② 100℃에서 2분간 가열한다.
③ well에 standard protein용액과 시료용액 5종류를 넣는다(10-20㎕).
* well순서 : P 0.5→S→C→F 0.3→F 0.5→P 0.2→P 0.5→F 0.3→F 0.5→P0.2
* 5% sample buffer 10ml : 0.6ml 1M TRIS-HCL(pH 6.8), 5ml 50% glycerol,
2ml 10% SDS, 0.5ml 2-mercaptoethanol,
1ml 1% bromophenol blue, 0.9ml H2O

참고자료

· (알기쉬운) 식품분석 화학, 우자원, 광문각
· 식품화학, 윤석권외 4인 공저, 수학사