[일반생물학및실험] Bradford assay를 통한 단백질 정량 실험 결과 보고서

소개글

Bradford assay 실험 후, A+ 받은 결과 보고서입니다.
실험 분석을 통해 실험 과정상의 원리와 실험 결과에 관한 해석 등을 자세히 적었습니다.
특히 표준곡선을 구하고, 이를 통해 실험에서 사용한 우유 속 단백질 양을 구하는 방법이 자세히 설명되어 있습니다.

목차

1) 실험 제목
2) 실험 목적
3) 서론
4) 실험 기구 및 방법
5) 실험 결과 (표준곡선 표와 그래프도 포함되어 있음)
6) 실험 분석
7) further study
8) 참고

본문내용

세포를 이루고 있는 생체 거대분자에는 크게 탄수화물, 단백질, 지질, 핵산이 있는데, 그 중 단백질은 원형질과 효소의 구성요소이다. 단백질의 양을 정량하는 방법에는 대표적으로 Bradford Assay가 있는데, 그 원리와 방법은 다음과 같다.
-원리 : 단백질의 양이온 부분과 Bradford 시약 속 Coomassie Brillant Blue G-250의 음이온 부분이 만나 정전기적 인력에 의한 결합을 이루며 Coomassie의 색깔은 갈색에서 푸른색으로 변한다. 여기서 Coomassie Brillant Blue G-250는 최대 흡광도를 465nm에서 595nm로 이동시키는데, 595nm에서 표준용액의 흡광도와 발색된 시료의 흡광도를 비교하여 단백질의 양을 측정해낸다.(595nm에서의 흡광도는 단백질의 농도와 비례한다.)

<중 략>

4) 실험 기구 및 방법
-실험 기구 : Bradford reagent 5.5ml(Coomassie Brillant Blue G-250가 들어감), BSA(1mg/ml) 0.03ml, 파이펫(20μl, 200μl, 1000μl짜리), 팁, 시험관, 우유, 증류수, 분광 광도계(Spectrophotomete), 큐벳(Quartz cuvettes)
-실험 방법 :
1. 시험관에 1/100, 1/500, 1/1000, 1/2000이라고 라벨링 한다.
2. serial dilution
(1) 1/100으로 라벨링한 시험관에 우유를 10μl, 증류수를 990μl 넣어서 우유를 1/100로 희석시킨 액체를 만든다.
(2) 1/500으로 라벨링한 시험관에 (1)의 액체를 200μl, 증류수를 800μl 넣어서 우유를 1/500으로 희석시킨 액체를 만든다.

참고 자료

http://cafe.naver.com/goondae/367387
http://blog.naver.com/withcoffee67?Redirect=Log&logNo=70157521263
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http://kin.naver.com/qna/detail.nhn?d1id=8&dirId=8020303&docId=170016906&qb=7Jqw7Jyg64aN64+E&enc=utf8&section=kin&rank=1&search_sort=0&spq=0&pid=RT4EXF5Y7t0ssb/s7YVsssssss4-039434&sid=UWImunJvLB0AAG-AGDw
http://kin.naver.com/qna/detail.nhn?d1id=8&dirId=802&docId=32763739&qb=7Jqw7JygIDHrpqzthLAg7KeI65+J&enc=utf8&section=kin&rank=1&search_sort=0&spq=0&pid=RT4FCU5Y7uRsscBfrUGsssssstd-423075&sid=UWImunJvLB0AAG-AGDw