DNA cloning & Restriction analysis of Plasmid DNA

소개글

DNA cloning, DNA복제, Plasmid DNA, 플라스미드, restriction analysis, 제한효소

목차

1. DNA cloning
1) 정의
2) 원리
3) 과정

2. 플라스미드를 이용한 제한단편의 클로닝
1) 설명
2) 플라스미드가 운반체로써 유용한 특성

3. 벡터
1) 설명
2) 벡터의 성질

4. 제한효소

5. restriction analysis of Plasmid DNA

본문내용

< DNA cloning >
정 의
: DNA를 자르거나 잇는 등의 조작을 거쳐 세포에 도입하고 복제함으로써, DNA 단편을 증폭하여 얻는 조작이다.

원 리
: 분자 클로닝의 기본은 원하는 유전자를 크고 복잡한 게놈으로부터 작고 간단한 게놈으로 옮기는 것이다. 시험관내 재조합(in vitro re-combination)을 통해 원하는 유전자를 얻고, 이 DNA 조각을 벡터(vector)에 연결시킨 후 세포에 도입하면 새로 도입된 DNA를 지닌 세포가 분열을 거듭하여 클론(clone)을 생성한다. 클론 내의 세포들은 모두 동일하므로 도입된 DNA도 같은 수로 증폭된다. 이 세포들을 대량으로 배양한 뒤 DNA를 추출하면 연구하거나 조작하기에 충분한 만큼의 원하는 DNA를 얻을 수 있게 된다.
- DNA cloning은 보통 플라스미드나 바이러스 운반체를 사용하여 세균에서 이루어진다.
- 시험관내 재조합 과정에서는 제한효소와 DNA 리가아제를 사용한다.

<중 략>

제한효소에는 type I, II, III가 있으며 실험실에서는 주로 type II를 사용한다.
이 효소들은 다음과 같은 특징이 있다.
1) 이름은 발견된 세균, serotype, 발견 순서로 명명한다.
Hinf III : Hemophilus influenza type f, 세번째(III) 효소
2) 인식부위와 절단부위가 같고 특이적(specific)이다.
3) Palindrome을 주로 인식한다.
4) 절단 후 모양은 세 가지가 가능하다.

참고 자료

네이버 지식백과 – DNA cloning, http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1260728&cid=200000000&categoryId=200003029
연세대학교 의과대학 생화학, 분자생물학 교실 http://biochemistry.yonsei.ac.kr/sub/catalog.php?CatNo=13&gene=14
분자생물학, David Freifelder 저, 민경희 역, 1998.2.22., 아카데미서적, 134-136p
대학미생물학 제8판, 민경희 외, 2000. 2. 20., 탐구당, 449-458p
필수유전한 제4판, 양재섭 외 역, 2007. 3. 20., 월드사이언스, 361p