미생물 배양부터 그람염색까지

목차

Ⅰ. Introduction
Ⅱ. Material & method
Ⅲ. Result
Ⅳ. Discussion
Ⅴ. Reference

본문내용

Ⅰ. Introduction

실험날짜 : 2012. 11.
실험목적 : 이번 실험을 통해 미생물 3차 Steaking법을 이용한 특정 미생물만을 분리 와 배양을 할 수 있고, 분류에 중요한 지표가 되고 있는 Gram염색의 기술을 익히고 세균의 Gram 염색에 따른 분류와 Gram 염색의 원리를 익힌다.

Gram 염색법은 Gram(1884)에 의해 고안된 방법으로, 전 세균군을 두 가지로 분류가능한 중요한 지표이다. 세균을 도말, 건조, 고정 후 알칼리성의 색소(crystal violet, gentian violet 등)로써 염색한 다음, 약산화 촉매로써 처리하면, 중성의 탈색제 (95%이상 순 ethanol 또는 acetone)로써 탈색하면 쉽게 탈색되는 균(Gram 음성균)과 탈색되기 어려운 균(Gram 양성균)으로 나눌 수 있다. Gram 염색에 의해 양성과 음성으로 되는 것은 세균의 세포벽의 물리적인 차이에 의한 것이다.
이런 방법은 세균학적 측면에서 매우 중요한 기술 중의 하나이다. 또한 균의 증식에 필요한 영양소의 종류, 물리·화학적 자극에 대한 반응, 생산하는 독소, 병변 등 각 방면에서 차이가 있다는 것을 알게 되면서 Gram 염색법의 의의는 증대하였다.

Gram 염색 원리

세균은 Gram 양성균과 Gram 음성균의 두 그룹으로 나누어 질 수 있다. 이 두 가지의 구별법은 Gram 염색반응에 기반을 두고 있다. 세균의 세포벽은 크기와 형태를 유지하게 하며 삼투압에 의한 세포 파열을 방지하는 역할을 한다. 세포벽 구조의 차이가 Gram 염색 반응에 가장 중요한 역할을 하는데, 세포벽에는 펩티도글리칸이라고 하는 물질이 있기 때문에 단단하다.
Gram 양성균의 경우, 세포벽의 90%까지는 펩티도글리칸으로 구성되어 있다. 일부 세균은 세포 주위에 펩티도글리칸의 단일층을 가지고 있지만, 대부분의 세균, 특히 Gram 양성균은 중첩된 여러겹(최대25)의 약 80-90%의 펩티도글리칸층을 가지고 있고 매우 두꺼우며 거의 모두 한 종류의 분자로 구성되어 있다.

참고자료

· 서승교 외 1/ 미생물실험법/ 보문각/ 2005/ p.77-86
· Madigan 외 3/ Brock의 미생물학 12/ 2009/ p.80-85
· 강신성 / 생물과학/ 아카데미서적/ 2000/ p.136-138
· 김영권 외 25/ 최신 미생물학 실험/ 고려의학/ 2007/ p.43-45 p.76-79