ELISA 효소 결합 면역 흡착법의 실험원리와 방법, 고찰입니다.

소개글

효소결합 면역 흡착법 ELISA에 대한 실험 원리를 구체적으로 사진과 함께 기술하였으며 ELISA의 다양한 방법에 대하여도 기술하였습니다. sandwich ELISA의 실험 방법과 직접실험한 결과 또 discussion도 기술 하여서 참고하시면 좋을 듯 합니다.

목차

1. 실험 제목

2. 실험 목적

3. 실험 원리
3-1. ELISA란
3-2. ELISA의 방법들
3-3. 인터페론 이란

4. 실험 방법

5. 실험 결과

6. Discussion

7. 참고 문헌

본문내용

< ELISA란? > (indirect ELISA)

:> Enzyme-linked immuno sorbent assasy(ELISA)는 Enzyme immunoassay(EIA)라고도 불린다. 이는 sample안의 antigen 혹은 antibody를 detection하기 위한 immunology를 사용한 biochemical technique이다. ELISA는 diagnostic tool로 사용되고, plant pathology등 여러 산업에서 사용된다.
ELISA는 섞여있는 antigen들을 surface에 affix 시켜놓고, 우리가 찾길 원하는 specific antigen의 specific antibody를 표면에 넣어주어 항체-항원 반응을 함으로써 이루어진다. antibody는 Enzyme에 연결되어있는데, 마지막 step에 substance를 넣어주면 enzyme이 이를 detectable한 signal로 바꾸어 주어 color를 발색한다. 그래서 specific한 antigen만을 찾을 수 있는 것이다. ELISA를 실시할 때는 최소한 하나의 antibody가 있어야 하는데 이는 particular antigen에 binding 할 수 있는 것이다. 그리고 unknown amount of antigen들은 solid support (주로 polystyrene microtiter plate)에 immobilize되어야 한다. Antigen이 immobilized된 후엔 antibody를 넣어주어 complex를 형성하는데, 이때의 과정의 다양성으로 ELISA방법이 나누어진다. 이 후 직접적으로 enzyme과 covalent bond를 하고 있는 detection antibody나 bioconjugation을 하고 있는 secondary antibody를 넣어준다. step 사이사이마다 plate는 wash 되어야 하는데, 이때는 detergent solution을 이용해 protein이나 남아있는 (specifically bond를 형성하지 않은) antibody를 제거해 주는 것이다. 마지막 wash step이 끝나면 plate에 enzymatic substrate를 넣어주어 visible signal을 생성하는데 이를 정량해 sample안의 antigen의 양을 결정한다.

참고 자료

http://kin.naver.com/qnd/print.nhn?dirId=1116&docId=61684811 -> ELISA의 기법들
en.wikipedia.org/wiki/ELISA
-> ELISA에 관하여
en.wikipedia.org/wiki/sandwichelisa
-> Sandwich ELISA에 관하여
알기쉬운 바이러스 -오상진
-> interferon이란?