Mini-Prep & Electrophoresis of Plasmid DNA

소개

DNA절편을 늘리는 간단한 방법으로는 PCR이 있다. 하지만 PCR이 이뤄지는 in-vitro조건에서는 생체내의 DNA 수선 메커니즘이 일어나지 않으며, 너무 긴 DNA 절편은 증폭하기 쉽지 않다. 따라서 일반적으로는 DNA절편의 증폭에는 subcloning이 사용된다. mini-prep은 이렇게 대장균이 증폭한 DNA절편(플라스미드)을 다시 회수하는 실험기법이다. mini-prep의 과정을 요약하면 아래 『그림 1』과 같다.
『그림 1』mini-prep 과정 요약
이번 실험을 통해서 우리는 BAC library와 cDNA library로부터 clone을 배양하여 Plasmid DNA를 정제할 것이며, 여기에서 얻어낸 DNA를 전기영동해서 clone의 특성 및 DNA 크기에 따른 전기영동 현상을 이해해보도록 할 것이다.

목차

Ⅰ. Introduction
Ⅱ. Materials & Methods
Ⅲ. Results
Ⅲ. Discussion
Ⅳ.Reference

본문내용

Ⅰ. Introduction

DNA절편을 늘리는 간단한 방법으로는 PCR이 있다. 하지만 PCR이 이뤄지는 in-vitro조건에서는 생체내의 DNA 수선 메커니즘이 일어나지 않으며, 너무 긴 DNA 절편은 증폭하기 쉽지 않다. 따라서 일반적으로는 DNA절편의 증폭에는 subcloning이 사용된다. mini-prep은 이렇게 대장균이 증폭한 DNA절편(플라스미드)을 다시 회수하는 실험기법이다. mini-prep의 과정을 요약하면 아래 『그림 1』과 같다.

『그림 』mini-prep 과정 요약


이번 실험을 통해서 우리는 BAC library와 cDNA library로부터 clone을 배양하여 Plasmid DNA를 정제할 것이며, 여기에서 얻어낸 DNA를 전기영동해서 clone의 특성 및 DNA 크기에 따른 전기영동 현상을 이해해보도록 할 것이다.

참고자료

· http://blog.naver.com/jini10045?Redirect=Log
· http://en.wikipedia.org/wiki/CDNA_library, 위키피디아, 검색일자 : 11.11.26.
· http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular, 연세대학교 의과대학 생화학-분자생물학교실, 검색일자 : 11.11.26.