[세포생물학]【A】세포분획과 세포소기관

소개

대학원수업 발표에 사용한 자료입니다.

목차

1. 원생동물과 진핵생물
2. 동물세포의 구조
3. 세포분획법
4. 세포소기관 분리
5. 표지분자
6. 원심분리
7. 원심분리의 원리
8. 박테리아
9. 세포질
10. 세포골격
11. 핵

본문내용

목적 : 각 세포 구획의 기능을 밝히기 위함
세포 소기관을 분리하는 방법
1. 균질기 이용
2. 효소 용해법(enzymatic lysis)
3. 조직을 얼린 후 갈아냄
4. 회전하는 칼날로 분쇄
5. 압력변화
6. 삼투압 충격
7. 동결-용해 반복
세포 분획법
세포 소기관을 손상시키지 않고 분리하기 위해서는 세포 내부 삼투압과 동일한 등장액으로 맞춰 사용해야 한다. (ex-0.9% NaCl)
세포 소기관을 분리하기 위해서는 원심분리(centrifugation)과정을 거친다.
0~5℃의 낮은 온도에서 시행
-세포 내에 있던 효소나 세포를 융해시키는 성분이 작용하는 것을 최소화
세포 소기관 분리
g=9.81㎳2
minute
표지분자
원심분리
강한 원심력으로 밀도 차가 작은 물질을 분리
장비
1. 탁상용 원심분리기 15000g
2. 고속 원심분리기 50000g
3. 초고속 원심분리기 500000g
입자 침강 속도는 rotor울기 속도, 회전반경, 입자의 침강 특성과 관련
침강계수(sedimentation coefficient) : S
원심분리의 원리
편차 원심분리 (differential centrifugation)
크기에 따라서 뿐만 아니라 같은 질량의 밀도가 큰 입자와 작은 입자를 분리 - 크기는 비슷하지만 밀도가 다른 입자를 분리하는데 유용
장점
1. 분리에 소요되는 시간이 몇 분 정도로 짧게 소요
2. 분리매질이 간단하고 가격이 경제적
문제점 : 튜브의 위쪽에 있는 큰 입자가 침전되는 동안 아래쪽에 있는 작은 입자와 함께 침전 - 동시침전을 개선하는 방법은 침전물을 다시 녹여 원심분리를 하는 것이나 이 방법은 회수율이 떨어지며 손상을 입기 쉬운 물질의 분리에는 적용하기가 어려움

참고자료

· 없음