(생화학실험)시료준비와 단백질정량

소개

시료준비와 단백질정량

목차

2. 시료준비와 단백질정량
실험목적
실험결과
토의

본문내용

2. 시료준비와 단백질정량
실험목적
1. 완충용액의 특성을 이해하고, 세포의 파쇄방법을 익힌다.
2. 단백질 정량 방법과 원리를 이해하고, bradford법을 이용하여 단백질농도를 계산하고
전기영동용 시료를 준비한다.

실험결과
1. BSA 표준 단백질의 흡광도 측정 결과
- Blank용 (증류수만 넣은 test tube) : 0.000
2. BSA 표준 단백질의 흡광도-단백질 농도 그래프
흡광도의 평균값을 X축, 단백질 양을 Y축으로 하여 측정값을 표시하고 추세선의 2차
방정식(Y = a + b₁X + b₂X²)을 구하여 a값, b₁값, b₂값과 R² 표시하세요.

5. 실험을 통하여 얻은 결과를 설명하시오.
기준이 되는 단백질인 BSA의 양을 달리하여 흡광도를 측정하였다. 다른 양에서는 1, 2차의 흡광도가 유사하게 나왔지만, BSA가 1㎍ 일 때만 흡광도 측정의 차가 크게 나타났다. 측정한 결과 값으로 그래프를 그렸는데 앞의 잘못된 결과로 인해 BSA 1㎍ 용액의 측정값이 포함된 그래프는 그 값을 제외한 그래프보다 신뢰도가 떨어지고 그래프 모양도 삐뚤어졌다. 신뢰도를 높이기 위해 BSA가 1㎍용액의 측정값을 제외한 자료를 이용해 단백질의 농도를 구했다. 단백질의 농도는 Y = 8.6516X² + 8.0829X - 0.0127 (X:흡광도, Y:단백질의 농도)를 이용해 계산했다. 근원세포의 흡광도가 0.1625로 측정되었으므로, 단백질의 농도는 8.6516*(0.1625)² + 8.0829*0.1625 - 0.0127 = 1.529228㎍이었다. 근관세포의 흡광도는 0.186이므로, 8.6516*(0.186)² + 8.0829*0.186 - 0.0127 = 1.79003㎍이었다.

참고자료

· 생명공학실험서, 한국생물공학회 저, 2000년, 28~29쪽
· 분자세포생물학, 박상대 등 저, 1998년, 46쪽
· 식품분석, 이근보 저, 2002년, 236쪽
· 식품미생물학, 김창한 저, 2004년, 91쪽
· 분자세포생물학, 박상대 등 저, 1998년, 15쪽
· 식품분석, 이근보 저, 2002년, 345쪽