■ 실험 목표
1. 혐기성 미생물 중 대표적인 미생물이라 할 수 있는 혐기성 박테리아가 자랄 수 잇는 배지를 만들어 본다.
2. 만든 배지를 이용 혐기성 박테리아을 키워보고 관찰한다.
■ 실험 준비물
Anaerobic gassing system(혐기가스 시스템), Roll tube (유리관), Anaerobic Broth 배지(혐기액체 배지), Bacto Agar (젤라틴화배지), Autoclave(멸균기), Water bath(항온수조), Rumen Fruid(반추위액), Resazurin(착색제)
Cysteine(환원제)
■ 실험 방법
1. Anaerobic Broth 배지에 일정량의(2%) Bacto Agar를 넣고, Anaerobic gassing system으로 Resazurin은 혐기상태유지위해 0.3cc를 투여한다. Anaerobic gassing system(300도로 수분을 증발시켜 H2o 제거 하고 가스만 지나가게 함) 으로 사용하여 그리고 Cysteine을 넣으면 산소를 빨리 제거해 주는데 300ml당 30ml을 넣어야 한다.
2. Roll tube에 각각 9ml 분주 후 outoclave를 사용하여 멸균한다. 이때 121도에서 15분정도 멸균하는데 용액 색깔이 붉은 빛이 띠면 아직 산소가 남아 있다. 혐기상태의 배지를 만든다.
3. 미리 준비한 희석된 위액을 1ml 접종한다. 단단히 막아준다.
4. Rolling기를 이용하여 골고루 Roll tube 벽면에 골고루 굳을 수 잇도록 한다.
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