세균의 유전자 재조합

소개

세균의 유전자 재조합 현상(형질전환, 형질도입, 접합) 중에서 형질전환의 과정과 원리를 이해하고, 형질전환된 유전자 재조합체 세균을 제조하는 실험 방법을 익힌다.

목차

Ⅰ. Purpose
Ⅱ. Principle
Ⅲ. Materials
IV. Results and discussion

본문내용

Ⅰ. Purpose
세균의 유전자 재조합 현상(형질전환, 형질도입, 접합) 중에서 형질전환의 과정과 원리를 이해하고, 형질전환된 유전자 재조합체 세균을 제조하는 실험 방법을 익힌다.

Ⅱ. Principle
원하는 유전자를 대량 생산하기 위해 유전자 재조합을 수행할 수 있다.
유전자 재조합이란 한 생물의 유전자를 다른 생물의 DNA에 삽입하여 필요한 유전물질을 생산하는 기술이다. 세균의 유전자 재조합에는 형질전환(transformation), 형질도입(transduction), 접합(conjugation)이 있으며 이 중 형질전환은 수용 세균(recipient)이 공여 세균(donor)의 DNA 일부를 받아들여 자신의 염색체 DNA가 재조합되는 것이다.

인공 형질전환은 인위적으로 우리가 원하는 유전자를 제한효소를 이용하여 절단하고, 벡터(vector)에 삽입하여 재조합된 DNA를 세균 세포막 안쪽으로 집어넣어 형질전환시킴으로써 원하는 유전자를 보유한 세균을 확보하고 증식시킨 후 벡터를 분리하여 원하는 유전자를 다량 확보할 수 있다.

벡터(Vector)란 원하는 유전자를 세균에 운반해주는 역할을 하는 DNA를 일컫는다. 벡터에는 여러 종류가 있지만 그 중에서 가장 널리 쓰이는 것이 플라스미드(plasmid)와 파지(phage)이다.

in vitro에서 유전자 재조합체를 만들 때 염색체 DNA의 일부를 vector DNA로 옮겨 이식하는 과정을 클로닝(cloning)이라 한다.

형질전환을 할 때에는 세균이 재조합된 DNA를 세균 안으로 수용하는 효율이 높은 능력을 가진 세균을 사용하는 것이 유리하다. 그렇기 때문에 세균에 물리적․화학적 처리를 하여 외부 DNA를 받아들이는 능력을 향상시킨 수용 세균(recipient)을 수용 세포(competent cell)라고 한다.


Ⅲ. Materials
1. Strains
Escherichia coli 표준균주 : donor
Escherichia coli DH5ɑ(competent cell) : recipient

참고자료

· 없음